Factores que influyen sobre la actividad enzimática.

Factores que influyen sobre la actividad enzimática.

Las reacciones químicas que se dan en los seres vivos no podrían tener lugar sin la presencia de los enzimas.

Estas macromoléculas, que generalmente son proteínas, catalizan las reacciones bioquímicas, permitiendo que los sustratos se conviertan en los productos que necesita la célula. Como todo catalizador, las enzimas no se consumen en las reacciones que catalizan, pero a diferencia de otros catalizadores de naturaleza orgánica, las reacciones que catalizan son muy específicas, solo interaccionan con determinados sustratos, y solo facilitan el curso de determinadas reacciones.

Una enzima que podemos encontrar en todo los seres vivos es la catalasa, necesaria para descomponer el peróxido de H, un compuesto toxico, que se produce durante el metabolismo celular.

Objetivos.

Detectar los productos de la hidrolisis de la sacarosa, para demostrar la actividad enzimática fuera del organismo.

Relacionar la cantidad de glucosa detectada con el tiempo de reacción enzima-sustrato, para demostrar que la cantidad de producto depende del tiempo transcurrido.

Identificar los productos de la hidrolisis del almidón, para demostrar la producción de la milasa en las semillas en germinación.

Metodología.

Extracción de una enzima.

Observación de la acción catalítica del extracto enzimático.

Reacción de Benedict para identificar azúcares reductores.

PARTE II

Acción enzimática de germinados de vegetales.

Resultados

Tiempo Agua Sacarosa

0’ 250 (15)+ 100(5) +/-

2’ 250 (15)+ 250(15)+

4’ 250 (15)+ 500(30)++

10’ 250 (15)+ 500(30)++

Discusión de resultados

En la parte uno de la práctica se colocó 0.5 g de levadura seca en 5ml de acetona fría. Se dejó reposar por 30 min, una vez terminado ese tiempo, la levadura se puso a secar en un papel absorbente.

La levadura se agregó a un tubo de ensayo colocando Solución amortiguadora de fosfato y agitarla durante 10 min. Se recuperó el sobrante el cual que contiene la enzima.

En 8 tiras de glucocitina, se hicieron 2 filas con 4 tiras respectivamente.

En dos recipientes de reloj uno marcado con agua y otro con sacarosa, se les agrego 0.5ml de la enzima obtenida anterior mente.

Utilizando un palillo diferente para cada solución se removió hasta que quedo en una mezcla homogénea.

Se procedió a medir la cantidad de azúcar que se ha formado con las tiras de glucocitina.

En un tubo de ensayo se agregó 2 ml de solución de glucosa, agregando 10 gotas de reactivo Benedict.

Se calentó el tubo a baño María durante 5 min. Observando si cambio de color o no, se repitió el procedimiento con solución de sacarosa.

En otro par de tubos de ensayo se colocó en ambos 2 mil de solución de sacarosa. En uno de ellos se le agrego 2 ml de extracto enzimático de levaduras y al segundo 2 ml de agua destilada, agitando por 15 minutos.

Pasado los 15 minutos, en ambos se les agregó 10 gotas de reactivo Benedict, se calentaron los tubos a baño María durante 5 minutos observando el cambio de color que se pudo generar en alguno de los tubos

Parte dos de la práctica, se machacó 5 gramos de diferentes germinados en un mortero con 10 ml de agua destilada.

En dos cajas de Petri los cuales contenían gelosa-almidón, se dividió en cuatro sectores en la base con un lápiz graso.

En cada sector se perforo con un gotero un pequeño círculo, en cada perforación se le coloco cinco gotas del macerado de los dientes germinados, posteriormente se le añadió saliva.

Se dejó un de las cajas Petri a temperatura ambiente por 24 horas y la otra se dejó reposar en un refrigerador.

Pasado ese tiempo se le añadió lugol hasta cubrir la superficie de la placa. Dejando reposar durante una hora la caja de Petri a temperatura ambiente para verificar si los halos se conservan del mismo diámetro.

Cuestionario

Observación de la acción catalítica del extracto enzimático libre de células.

1) ¿Cómo demostraría que la levadura se encuentra muerta después del tratamiento con acetona fría?

Porque las células de la levadura necesitan estar a una temperatura de

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