AISLAMIENTO DE BACTERIAS FERMENTATIVAS: RUTAS DE PRODUCCIÓN DE ÁCIDOS MIXTOS Y DE 2,3-BUTANODIOL
Enviado por ksantosmancilla • 9 de Octubre de 2015 • Informe • 1.567 Palabras (7 Páginas) • 204 Visitas
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
LABORATORIO DE FISIOLOGÍA MICROBIANA
AISLAMIENTO DE BACTERIAS FERMENTATIVAS: RUTAS DE PRODUCCIÓN DE ÁCIDOS MIXTOS Y DE 2,3-BUTANODIOL
KELLY J. SANTOS MANCILLA
C.C. 1140849623
- FLUJOGRAMA[pic 2]
[pic 3][pic 4][pic 5]
[pic 6][pic 7][pic 8]
[pic 9]
[pic 10][pic 11][pic 12][pic 13][pic 14][pic 15][pic 16]
[pic 17][pic 18][pic 19][pic 20][pic 21][pic 22][pic 23][pic 24][pic 25][pic 26][pic 27][pic 28][pic 29][pic 30][pic 31][pic 32][pic 33][pic 34][pic 35][pic 36][pic 37][pic 38][pic 39][pic 40][pic 41][pic 42][pic 43][pic 44][pic 45][pic 46][pic 47][pic 48][pic 49][pic 50][pic 51][pic 52][pic 53][pic 54][pic 55][pic 56][pic 57][pic 58][pic 59][pic 60][pic 61][pic 62][pic 63][pic 64][pic 65][pic 66][pic 67][pic 68][pic 69][pic 70][pic 71][pic 72][pic 73][pic 74][pic 75][pic 76][pic 77][pic 78][pic 79][pic 80][pic 81][pic 82]
- OBJETIVOS
- Utilizar un esquema tradicional para aislar microorganismos fermentadores de la familia Enterobacteriaceae a partir de una muestra de suelo.
- Evaluar el microorganismo y establecer una posible ruta metabólica.
- Crear destreza en varias técnicas usadas con frecuencia en el laboratorio de Microbiología.
- Entender el fundamento de algunas de las pruebas bioquímicas utilizadas para la caracterización de microorganismos
- RESULTADOS
- MacConkey
Colonias de microorganismos fermentadores de lactosa.
- Tinción de Gram
[pic 83]
Colonia 1: Al Gram se observan bacilos gram negativos.
Colonia 2: Al Gram se observan bacilos gram negativos.
- Prueba de Oxidasa
[pic 84]
Colonia 1: Oxidasa negativo.
Colonia 2: Oxidasa negativo.
- Agar OF Glucosa
C1: Microorganismo fermentador, móvil.
C1’: Microorganismo fermentador, móvil.
C2: Microorganismo fermentador y productor de gas, móvil.
C2’: Microorganismo fermentador, móvil.
[pic 85][pic 86][pic 87][pic 88][pic 89]
- Prueba de Rojo de Metilo
[pic 90] [pic 91]
Colonia 1 Colonia 2
Colonia 1: Positiva para rojo de metilo.
Colonia 2: Positiva para rojo de metilo.
- ANÁLISIS DE RESULTADOS
Luego de hacer la siembra en el agar MacConkey y dejar incubar, pudimos observar la presencia de colonias rosadas, ya que debido a la fermentación de la lactosa se produce un viraje del color del indicador (rojo neutro) que contiene el medio de cultivo diferencial. El medio de cultivo es además selectivo ya que contiene una mezcla de sales biliares y de cristal violeta que inhiben el crecimiento de gran parte de bacterias Gram positivas y permite el crecimiento de bacterias Gram negativas entre las que se encuentran toda la familia de Enterobacteriaceae (1), es necesario de igual manera hacer una comprobación mediante una tinción de Gram. Para hacerla se seleccionaron cuatro colonias que hayan sido lactosa positivas y se sembraron en agar nutritivo, con el fin de obtener cultivos axénicos y diferentes microorganismos para realizarles las pruebas.
Posteriormente se procedió a hacer la tinción de Gram para así verificar que se trataran de bacilos Gram negativos. Como sabemos la tinción de Gram permite diferenciar un grupo de bacterias del otro, debido a la diferencia en las paredes celulares de los mismos; ya que las bacterias Gram positivas tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, en cambio las Gram negativas tienen una capa de peptidoglicano más fina y una capa lipopolisacárida externa. Tras la tinción con cristal violeta y la adición de lugol se realiza un lavado con alcohol acetona que arrastrará el colorante en las Gram negativas (debido a la estructura de su pared), y al agregar el colorante de contraste safranina quedarán de color rosado (2). La comprobación de la morfología de las bacterias y la coloración rosada de nuestro interés, además de la verificación que no se tratara de un cultivo mixto, se realizó mediante la observación de las placas en el objetivo de 100x de un microscopio.
...