Actividad 15: PROYECTO INTEGRADOR Idea: análisis de microbiología (e-coli)

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04 de Abril de 2019

Nombre alumno (a): Blanca Estela Rios López

                                 Mónica Galván fajardo

                                 Nallely Rico Ontiveros

Profesor (a): Felipe Morado

Materia: Diseño y análisis de experimentos

Carrera: Ingeniería industrial

UNIDEG, plantel Comonfort

Actividad 15: PROYECTO INTEGRADOR

Idea: análisis de microbiología (e-coli)

1.- Explicación del proceso

Se ha notado que en los últimos 3 meses ha habido un incremento de desviaciones en el resultado de este análisis, la acción correctiva es reanalizar el proceso ya que se han notado varios factores que pueden estar interviniendo en el resultado.

La mayoría de las E. coli (cerca del 97%) produce beta-glucurónicas, la que a su vez produce una precipitación azul asociada con la colonia. Cerca del 95% de E. coli producen gas, representado por colonias entre azules y rojo-azules asociadas con el gas atrapado.

Regularmente esto provoca el retraso de liberación y aseguramiento de inocuidad.

2.- Factores

• Preparación de cultivo
• Esterilización de material y equipos
• Lugar adecuado de preparación
• Personal que realiza el muestreo
• Buenas prácticas de manufactura en análisis de proceso

3.- Variable de respuesta

• Coloración de cultivo
• Conteo de colonias
• Limites de colonias
• Temperaturas desde 0° hasta 40°

4.- Elección del diseño experimental. Y presentar modelo matemático.

Se toman varias opciones para realizar el experimento.

1. Preparación de cultivo:

• Laboratorio cerrado

• Esterilización de manos
• Esterilización de equipo: mesa, pipetas, dispersor.

1. Hidratar las placas con 1 ml agua destilada.
2. Baje con cuidado la película superior para evitar que atrape burbujas.
3. Almacenar en refrigerador por 1 hora.
4. Tomar muestras.

• La misma persona se dirige hasta el lugar de muestreo.
• Se asigna otra persona para el muestreo
• Se toma la muestra directamente de la maquinaria
• Se toma la muestra y se almacena en bolsas resellables
• Las placas son almacenadas en una bolsa resellable para su transportación al laboratorio
• Las placas se conducen al laboratorio sin ninguna protección
• Se dirige al laboratorio previamente esterilizado y se procede hacer la plantación de muestra en placas

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          VIABLE         NO VIABLE[pic 9][pic 10][pic 11][pic 12][pic 13][pic 14][pic 15][pic 16]

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Instrucciones para la inaculacion

1. Coloque ala placa petrifilm en una superficie plana y noivelada. Levante la película superior.
2. Con la pipeta coloque 1 ml de la muestra en el centro de la película inferior.
3. Baje con cuidado la película superior para evitar que atrape burbujas de aire. No la deje caer.
4. Con el lado liso hacia abajo, coloque el dispensador en la película superior sobre el inoculo.
5. Presione suavemente el dispensador para distribuir el inoculo sobre el área circular. No deslice el dispensador.
6. Levante el dispersor. Espere, por lo menos un minuto, a que solidifique el gel.

Incubación

1. Incube las placas caras arriba en grupos de no más de 20 pzs. Puede ser necesario humectar el ambiente de la incubadora con un pequeño recipiente de agua estéril, para minimizarla perdida de humedad.

 Interpretación

• Las placas pueden ser contadas con un contador de colonias estándar u otro tipo de lupa con luz.

5.- REALIZACION DE EMPERIMENTO.

Se tomarán en cuenta para este experimento 3 factores, con dos niveles cada uno:

                                                                      Nivel bajo                 nivel alto

• Preparación de cultivo                            Preparación en laboratorio              Comprar placas petrifilm
• Esterilización de material y equipos       No se aseguró la esterilización        Esterilización 100% efectiva
• Personal que realiza el muestreo        El 30 % de las veces  el personal no       El 70 % de las veces personal                    .                                                                      estaba capacitado para en muestreo      el personal si estaba capacitado                    

FACTOR A: Preparación de cultivo ( Si el personal lo prepara por sí mismo, podría alterar el funcionamiento si no se realiza el procedimiento como es debido a pie de letra, con las petrifilm se entiende que son más rápidas y cuentan con un margen de error muy cerrado)

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