Ataxia Espinocerebelar tipo3

ATAXIA ESPINOCEREBELAR TIPO 3

Análisis de expansión CAG del gen ATXN3

Maestrante: José Alberto Ovando Durán

Resumen        

La ataxia espinocerebelosa tipo 3 (SCA3) o enfermedad de Machado-Joseph (MJD), es el subtipo más común de ataxia cerebelosa autosómica dominante; trastorno neurodegenerativo que se caracteriza por ataxia, oftalmoplejía externa progresiva y otras manifestaciones neurológicas.

La prevalencia estimada es de 1-3 por cada 100.000, con importantes variaciones geográficas y étnicas. La prevalencia más alta se ha encontrado en las Azores - Isla de Flores (1/3472); tasas intermedias en Portugal, Alemania, Países Bajos, China y Japón; y menor prevalencia en América del Norte, Australia y la India.

La enfermedad se asocia con la expansión de una repetición CAG en el gen ATXN3 (14q32.1). La longitud normal de la repetición es de 12-44, mientras que la longitud de la repetición que causa la SCA3 es mayor de 56.

El diagnóstico se basa en el cuadro clínico, la historia familiar y en última instancia en las pruebas genéticas. En ausencia de tratamientos específicos para retrasar o detener el progreso de la enfermedad, el cuidado es sintomático y de soporte. El pronóstico es malo, pero se han descrito casos de pacientes que han sobrevivido décadas tras la aparición de los síntomas.

Palabras Claves: SCA3; MJD; expansión CAG; ubiquitina; gen ATXN3

Introducción

En general, las ataxias espinocerebelosas son consideradas como trastornos raros (prevalencia ~3:100.000). La enfermedad de Machado-Joseph, también conocido como SCA tipo 3, es una de las

SCAs más comunes en todo el mundo, alcanzando su mayor prevalencia en Islas Azores (~1:3472).

La MJD es clínicamente un trastorno autosómico dominante heterogéneo neurodegenerativo de inicio tardío (que ocurre a una edad media de 40 años), que implica el cerebelo, motor ocular y sistemas motores piramidal, extrapiramidal y periférico.

La MJD es causada por la expansión de una repetición de trinucleótidos CAG en el exón 10 del gen ATXN3 (14q32.1), que codifica para la ataxina-3. Este segmento está compuesto por una serie de tres bloques de construcción de DNA (citosina, adenina y guanina) que aparecen varias veces en una fila. Los alelos salvajes presentan 12-44 unidades de CAG, mientras que los alelos expandidos contienen entre 53 y 87 repeticiones CAG.

El rango variable de inicio de los síntomas refleja en gran medida las diferencias en la longitud de la repetición CAG. Sobre la base de esta variabilidad fenotípica, los investigadores portugueses clasifican SCA tipo 3 en varios subtipos:

• Subtipo I (13%) se caracteriza por un inicio a una edad temprana con espasticidad prominente, rigidez, bradicinesia y, a menudo con pequeña ataxia. Se asocia con expansión CAG más larga.
• Subtipo II, la más común (57%), se caracteriza por ataxia y signos de la neurona motora superior. Paraplejía espástica puede ser parte del fenotipo. Se asocia con una amplia gama de repeticiones CAG.
• Subtipo III (30%) se manifiesta a una edad más tardía con ataxia y polineuropatía periférica. Se asocia con repeticiones CAG más cortas.
• Subtipo IV se caracteriza por parkinsonismo-dopa sensible; este tipo no está asociado con ningún tamaño de repetición en particular.
• Subtipo V parecido a paraplejía espástica hereditaria. Ha sido sugerida por algunos investigadores; sin embargo, esta designación no ha sido comúnmente aceptada.

Esforzarse por colocar a los individuos afectados en un subtipo de SCA3 específico tiene poco valor clínico, porque la superposición es considerable.

Material y Métodos

• Muestras de gDNA y cDNA

El ADN y ARN total son extraídos a partir de leucocitos de sangre periférica, usando un procedimiento de salting-out y reactivo Trizol, respectivamente. El ARN total se somete a síntesis directa de cDNA usando el Sistema ThermoScript trascripción inversa (RT)-PCR con Oligo(dT)20, a 60°C durante 50 minutos.

• Determinación del tamaño de alelos

Para gDNA, fragmentos conteniendo la sección (CAG)n del gen ATXN3 (198 pb + (CAG)n) la amplicación se realiza utilizando las condiciones anteriormente descritas.

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