CARACTERIZACIÓN CUALITATIVA DE LA ACCIÓN ENZIMÁTICA DE CATALASA, PAPAINA, UREASA Y PROTEASA.

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CARACTERIZACIÓN CUALITATIVA DE LA ACCIÓN ENZIMÁTICA DE CATALASA, PAPAINA, UREASA Y PROTEASA.

OBJETIVOS:

Objetivo General:

•  Caracterizar la acción enzimática por medio de reactivos de identificación a través de cambios de coloración

Objetivos específicos:

• Demostrar la acción de las enzimas catalasa, papaína y proteasa, observando su acción sobre diferentes sustratos.
• Conocer el mecanismo de acción cada enzima sobre cada sustrato.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Las enzimas son proteínas cuya función es acelerar la velocidad de las reacciones químicas que se producen en el organismo y son necesarias para mantener su actividad biológica, disminuyendo la energía de activación.  “La actividad de una enzima depende de factores tales como la temperatura, el grado de acidez o pH, las disoluciones salinas, los solventes, los activadores y los inhibidores.” (TP-Laboratorio Químico, 2014)

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Modelo de la "llave-cerradura"

Las enzimas son muy específicas, como sugirió Emil Fisher en 1894. En base a sus resultados dedujo que ambas moléculas, enzima y sustrato, poseen complementariedad geométrica, es decir, sus estructuras encajan exactamente una en la otra, por lo que ha sido denominado como modelo de la "llave-cerradura", refiriéndose a la enzima como a una especie de cerradura y al sustrato como a una llave que encaja de forma perfecta en dicha cerradura. (Jencks, 1987)

ENZIMA UREASA

La ureasa cataliza la hidrólisis de la urea a dióxido de carbono y amoniaco. Se encuentra principalmente en semillas, microorganismos e invertebrados. En las plantas, la ureasa es un hexámero que consiste en seis cadenas idénticas y se encuentra en el citoplasma. En bacteria, consiste en dos o tres subunidades diferentes. Para su activación. (Lorenc, 2010)

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La forma más fácil de detectar cualitativamente esta enzima es por el incremento a causa en la alcalinidad cuando esta reacción se lleva a cabo en un medio sin reguladores de pH.

PROCEDIMIENTO

CARACTERIZACIÓN DE LA ENZIMA UREASA

1. Preparar la solución de urea agregando unos cuantos cristales en 2 ml de agua destilada.
2. Preparar el extracto de soja que contiene la ureasa}

2.1. Remoler las semillas de soja seco previamente remojadas

2.2. Separar con papel filtro el precipitado y usar el filtrado.

1. Mezcle 2 ml de solución de urea en un tubo de ensayo.
2. Agregar gotas de indicador.
3. Añadir 2 ml de la suspensión de soja a l tubo.

CARACTERIZACIÓN DE LA ENZIMA CATALASA

CARACTERIZACIÓN DE LA ENZIMA PAPAINA

RESULTADOS

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

En la experimentación con ureasa, con  el substrato (urea) presente, la ureasa lo descompone en dióxido de carbono y amoníaco. Disuelto en agua, el amoníaco aumenta el pH, un efecto visto con el indicador de fenolftaleína el cual tomará la coloración rosa debido al medio alcalino.

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