Caseina - Resumen

DISCUSIÓN

Sabemos que la caseína representa cerca del 77% al 82% de las proteínas presentes en la leche y para poder separar esta de las demás proteínas es necesario llegar al punto isoeléctrico, en el cual se  puede observar una propiedad característica de la caseína la cual es que esta se precipita llegando a un pH de 4.6; Esto se debe a que las proteínas poseen una carga neta cuando se dispersan en una solución y esta carga dependerá del pH del medio en el que se encuentren, al llevar la leche a un medio acido los grupos COOH de los aminoácidos aspártico y glutámico están en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lisina están protonados (NH3+). En otras palabras la proteína presenta su máxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad.

La leche ocupada durante la elaboración de la practica fue leche en polvo la cual funciono adecuadamente ya que se pudo recuperar una buena cantidad de caseína, previamente se realizó la precipitación de la caseína de una solución de coffe mate obteniendo muy poca cantidad de caseína la cual era insuficiente para realizar las absorbancias de esta en el espectrofotómetro, por esta razón durante la practica nuestro equipo utilizo la mitad de los volúmenes indicados, esto es debido a que existen factores por los cuales hay perdida de caseína, principalmente al separar el sobrenadante del precipitado, durante los lavados y al extraer la pastilla de caseína de los tubos queda una buena cantidad pegada en las paredes de este. Previamente se  realizó una curva de calibración con albumina, la cual nos dio un factor de correlación (R2) de 0.9686. El cual sirvió para poder determinar la cantidad de caseína presente en las lecturas que se realizaron a las muestras con caseína.

Pudimos calcular la cantidad de proteína obtenida en la muestra basándonos en la ley de Lambert y Beer la cual explica la absorción de luz por una sustancia y la concentración de esta, por lo que es necesario construir una curva patrón, para la cual ocupamos albumina y el reactivo de Biuret  el cual es una molécula formada a partir de dos moléculas de urea y este actúa formando complejos con los grupos amino y el cobre dando una tonalidad azul o violeta según sea la cantidad de proteína presente en la muestra y ya teniendo la curva patrón y el factor de correlación es posible determinar la cantidad de proteína que presenta una muestra problema. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina de NaOH que se une con los pares de electrones no compartidos del nitrógeno formando un complejo con los enlaces peptídicos, esto nos ayuda ya que debido a la cantidad de complejos que se formaron con la caseína pudimos determinar mediante el espectrofotómetro la concentración de cada muestra.  Cabe mencionar que la diferencia de proteína obtenida en los resultaos como se muestra en la tabla 2 es debido a que en algunos tubos ocupamos sobre nadante (los que presentan los valores mas bajos). D e igual forma la mayor absorbancia corresponde a la muestra que tiene el stock y en los demás casos se ocupo una dilución 1:4  y la caseína obtenida.

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