Cuestionario de Genetica

Cuestionario

1. ¿De qué depende la temperatura de alineación de los oligos?

La temperatura de alineamiento de los oligos o los primers es la temperatura, como su nombre lo dice, a la cual los oligos se hibridizan por complementariedad de bases a la región de la hebra molde que se va a amplificar y depende directamente de la composición del oligo, como el porcentaje de GC.

1. ¿De qué depende el tiempo de extensión?

La temperatura de desnaturalización y de alineamiento es suficiente de 30 a 60 s. Si es una buena máquina que llega rápidamente a la temperatura programada, con 30 s es suficiente. Para la extensión, dependiendo del tamaño que esperemos se utiliza más o menos tiempo para permitir que la polimerasa trabaje adecuadamente, si se espera un producto de 1 kb, con 1 min es suficiente, si es de 2 kb, 2 minutos, y si es menos, se hace la conversión equivalente.

1. ¿De qué depende el volumen de una reacción de PCR?

Del tipo y las características de la enzima.

1. ¿Qué ventaja tiene un termociclador con tapa caliente?

Las tapas calientes permiten calentar una muestra de forma más eficiente, lo que reduce al mínimo la formación de recocido no específico y atenuadores de imprimadores. Esta función también previene la condensación de agua en la tapa y la evaporación de las muestras.

1. ¿Qué ventaja tiene una premezcla de reacción comercial que viene liofilizada contra una comercial tradicional en presentación líquida?

Que sólo se le agrega ADN, oligos y agua. Es más eficiente en base a la contaminación de la muestra.

1. ¿Para qué sirve la tinta de carga?

Se utiliza en la técnica de electroforesis, después de concluir con la técnica de PCR, se toma la muestra, se mezcla con la tinta y de esta forma se puede ver que corre el ADN o la muestra en el campo eléctrico. El ADN es de carga negativa y tiende a correr al lado positivo, tiñiendo con la tinta y haciendo la electroforesis.

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