Cultivo para el aislamiento de micosis profunda

CULTIVO PARA EL AISLAMIENTO DE MICOSIS PROFUNDA

¿Qué es la micosis sistémica o profunda?

Son enfermedades producidas por hongos dimorfos, que viven en forma filamentosa en el ambiente de áreas geográficas definidas y una vez que ingresan, vía inhalación, en el hospedero mamífero, se convierten en formas parasitarias que son causantes de los signos y síntomas de la enfermedad que producen (1)

Clasificación de la micosis sistémica

Micosis sistémicas por hongos patógenos verdaderos

Las micosis sistémicas por patógenos verdaderos, son en general producidas por hongos dimorfos, lo que significa que el microorganismo puede tener dos formas: mohos (con hifas septadas y conidias) y otra forma habitualmente de levadura (en tejidos vivos), y producen infección en huéspedes con situación inmunológica normal. (9)

Tipos

✓ Paracoccidioidomicosis. (9)

✓ Histoplasmosis. (9)

✓ Coccidioidomicosis. (9)

✓ Blastomicosis norteamericana. (9)

Micosis sistémicas oportunistas

• Por hongos levaduriformes. (10)

✓ Candidosis.

✓ Criptococosis.

✓ Geotricosis.

✓ Neumocistosis.

• Por hongos mohos. (10)

✓ Aspergilosis.

✓ Zigomicosis.

✓ Feohifomicosis.

✓ Hialohifomicosis.

Muestras para diagnóstico laboratorial de Micosis Sistémicas

• Muestra respiratoria

Esputo por expectoración espontánea: La expectoración debe ser la primera de la mañana recogida en ayunas, y enviada rápidamente al laboratorio y refrigerada. Para un adecuado estudio micológico es necesario procesar tres muestras seriadas, recogidas en días sucesivos. Instruir al paciente que no debe expectorar saliva o moco dentro del recipiente. (1)

• Esputo inducido

 Se recomienda como alternativa el esputo inducido en el caso que no sea posible una expectoración espontánea. Cepillar la mucosa bucal, lengua y encías, previamente, enjuagar la boca del paciente con agua, usando un nebulizador, hacer que el paciente inhale aproximadamente de 20 a 30 ml de una solución fisiológica de NaCl 0.85%. Y recoger el esputo (1)

Calidad de la muestra de esputo

Su utilidad diagnóstica vendrá condicionada en gran parte por su "calidad", que se valora en función del número de leucocitos polimorfonucleares y células epiteliales planas presentes en la muestra. Si el examen microscópico no puede realizarse en el día de la obtención de la muestra, esta debe ser conservada en heladera a 4oC. (1)

• Secreción Traqueal

 Se puede considerar la alternativa al esputo en el paciente intubado y su valor diagnóstico es muy similar. Introducir una sonda de aspiración a través del tubo endotraqueal o de la traqueotomía. Instilar de una pequeña cantidad de solución salina estéril (± 5 ml) si la muestra es muy viscosa. Manual de Diagnóstico Micosis Sistémicas. Succionar las secreciones respiratorias. (1)

• Lavado bronquial y lavado broncoalveolar

 Pasar el broncoscopio a través de la nariz o la boca en pacientes no intubados ó a través de la vía del tubo endotraqueal en pacientes ventilados. Enclavar la punta del broncoscopio en un segmento bronquial. Inyectar solución fisiológica 0.85%, generalmente en volúmenes de 5 a 20 ml a través del canal del broncoscopio. Succionar suavemente la solución fisiológica y colocar dentro de un recipiente estéril, antes de administrar la siguiente alícuota. (1)

Otros líquidos de punción líquido pleural, ascítico (peritoneal), pericárdico y sinovial.

1. Limpiar el lugar donde se va a realizar la punción con alcohol y desinfectar con una solución de yodopovidona al 10%. (1)
2. El médico realiza asépticamente la aspiración percutánea con jeringa para obtener 5 ml de la muestra. Expulsar el aire de la jeringa e inocular la muestra dentro de un envase 2 estéril, hermético con tapa a rosca. (1)

Muestras de lesiones en mucosas

1. Limpiar con agua esteril. (1)
2. Raspar con bisturí la zona hasta un leve sangrado. (1)
3. Colocar el material en una lamina limpia y cubrir con laminilla. Preparar tres o cuatro de esta manera para observación en fresco (1)
4. Para cultivo pasar directamente del material obtenido con bisturí al medio de cultivo.(1)

Muestras de lesiones en piel (no mucosas) muestra superficial

PROCEDIMIENTO:

1. Dejar secar el antiséptico antes de tomar la muestra. (1)

2. Usando jeringa, aspirar de la parte más profunda de la lesión. Si hay vesículas, tomar líquido y material de la base de la herida. (1)

3. Si la aspiración inicial falla, inyectar solución fisiológica estéril, en forma subcutánea. (1)

4. Repetir el aspirado. (1)

Muestra de sangre para serología de micosis sistémicas

Se extraen 10 ml de sangre del paciente en ayunas, se trasvasa a un tubo seco tapa a rosca estéril, evitando la hemólisis, deje por lo menos por una hora a temperatura ambiente para que coagule, luego separe el suero por centrifugación, envase el suero en un vial plástico estéril para transporte y envíe al laboratorio refrigerado. Si su envío se demora más de una semana se conserva a –20 ºC. (1)

Conservación y transporte de la muestra

La muestra deberá ser procesada lo antes posible después de la recolección, mayor será la recuperación en cultivo u observación microscópica cuanto antes sea analizada. Las muestras deben ser remitidas al laboratorio el mismo día de su obtención, si esto no fuera posible, mantenerlas en el refrigerador, o de lo contrario mantenerlas en un lugar fresco y alejadas de losrayos solares. (1)

Agar Sabouraud simple

También conocido como agar dextrosa Sabouraud, es un medio de cultivo sólido, especialmente enriquecido para el aislamiento y desarrollo de hongos, como levaduras, mohos y dermatofitos. (2)

Uso previsto

El agar Sabouraud se usa para el aislamiento y cultivo de hongos (2)

Instrucciones

Incubación:Temperatura Duracion (2)

Combinaciones más utilizadas de agar dextrosa sabouraud con antibióticos

✓ Agar Sabouraud con cloranfenicol (2)

✓ Agar Sabouraud con gentamicina y cloranfenicol (2)

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