ESPECTROFOTOMETRIA

RESUMEN

El fósforo es un importante constituyente de los tejidos y células, es indispensable para la formación de ácidos nucleicos y moléculas transportadoras de energía. Para la determinación de fosforo en los alimentos, en la práctica se hizo reaccionar con molibdato de amonio y ácido 1-amino-2 naftol-4 sulfónico, originando un compuesto de color azul que es directamente proporcional a la cantidad de fósforo presente en la muestra. La medición de la cantidad de fosforo se midió en un espectrofotómetro calibrado a una longitud de onda de 460 y 660 nm.

INTRODUCCIÓN

El conocimiento del conjunto de los minerales de un alimento sé obtiene habitualmente la determinación cuantitativa de las cenizas totales que deja el alimento. El fósforo es un elemento no metálico y es el segundo mineral más abundante en el organismo. (García, 2000). El fósforo está distribuido en los alimentos, principalmente como sales de fosfato. Las fuentes más importantes son el marisco, la carne, los huevos, la leche, el queso, los frutos secos, las legumbres, los cereales y una amplia variedad de verduras. (Williams, 2002). El fosforo está presente unido a proteínas, lípidos, ATP y otras combinaciones orgánicas, también existe en forma de fosfatos y pirofosfatos. Si el analito que se va determinar por espectrofotometría visible es poco absorbente o no absorbe radiación, se le puede hacer reaccionar con algún reactivo para producir la especie absorbente denominada cromóforo. Cuando el ortofosfato se hace reaccionar con el molibdato de amonio se produce un complejo amarillo fosfomolibdato, el cual puede ser reducido por la acción del ácido 1-amino-2 naftol-4 sulfónico. El complejo reducido es conocido como “azul de molibdeno”. La intensidad del azul de molibdeno es directamente proporcional a la cantidad de fósforo presente en la alícuota de la muestra. (Villegas y cols, 2006). La medición de la cantidad de fósforo se mide en un espectrofotómetro calibrado a una longitud de onda de 400 nanómetros.

MATERIALES Y MÉTODOS

Se realizaron los cálculos necesarios para preparar 4 estándares a partir de la solución patrón de fósforo de: 0.08, 0.16, 0.32 y 0.64 mg de P/100 ml. Para la determinación de fósforo a cada estándar se le adicionaron 0. 25 ml de solución molibdica y 0.2ml de A.N.S se mezcló y aforo a 25 ml. Tratar tres alícuotas de la solución problema de igual manera que los estándares, añadiendo 2ml de la solución problema. Se efectuaron las lecturas de la absorbancia a la longitud de onda de 460 y 660nm, se graficó e interpolo para obtener la concentración del problema. Se realizaron los cálculos necesarios para reportar en % de fósforo y se obtuvo la recta teórica por el método de regresión lineal.

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