Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de reacción
Enviado por Rik77 • 24 de Agosto de 2019 • Ensayo • 682 Palabras (3 Páginas) • 569 Visitas
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Introducción
La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones químicas que son catalizadas por las enzimas. El estudio de la cinética enzimática permite explicar los detalles de su mecanismo catalítico, su papel en el metabolismo, cómo es controlada su actividad en la célula y cómo puede ser inhibida su actividad por fármacos o venenos o potenciada por otro tipo de moléculas.
Las enzimas, en su mayoría, son proteínas con la capacidad de manipular otras moléculas sin ser alterados por la reacción, esas moléculas son denominadas sustratos. Un sustrato es capaz de unirse al sitio activo de la enzima que lo reconozca y transformarse en un producto a lo largo de una serie de pasos denominados mecanismo enzimático. Algunas enzimas pueden unir varios sustratos diferentes y/o liberar diversos productos. [1]
La invertasa (β-fructofuranosidasa), conocida también con el nombre de sacarasa debido al sustrato más significativo sobre el que actúa (la sacarosa) de ahí que la enzima se conozca también, como ya se ha señalado, con el nombre de sacarasa. Esta enzima hidroliza la fructosa y la glucosa a través del enlace glucosidíco mediante la siguiente reacción reversible:
Sacarosa ↔ Fructosa + Glucosa[pic 4]
El nombre de invertasa hace referencia a que los productos de la reacción son conocidos como "azúcares invertidos" debido al cambio rotacional que modifica sus propiedades ópticas; de una rotación positiva o dextrógira a una rotación negativa o levógira. [2]
Objetivo
Demostrar que la velocidad de la reacción enzimática es directamente proporcional a la concentración de enzima.
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Resultados[pic 6]
Tubo | T | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Absorbencia (nm) | 0.0 | 0.316 | 0.702 | 0.504 | 0.624 | 0.882 |
Azúcar reductor (µM) | 0.0 | 2.65 | 6.10 | 4.35 | 5.20 | 7.65 |
Velocidad (U. de invertasa) | 0.0 | 0.265 | 0.610 | 1.305 | 1.560 | 2.295 |
Concentración de enzima (µg/2mL) | 0.0 | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
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Cálculos
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Análisis de resultados
Durante la práctica se llevó a cabo un análisis cuantitativo de la absorbancia obtenida con respecto a la concentración de enzima utilizada en cada tubo problema. La lectura de absorbancia a 540 nm fue posible gracias al reactivo utilizado (3,5-dinitrosalicílato) compuesto aromático que reacciona con azúcares reductores (glucosa y fructuosa) para formar ácido 3-amino-5-nitrosalicílico (y su isómero) a través de una reacción de óxido-reducción, obteniendo productos que fueron leídos en un espectrofotómetro a la longitud de onda ya mencionada.
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