Efecto de la concentración de la enzima y efecto del pH sobre la velocidad de reacción

Efecto de la concentración de la enzima y [pic 1][pic 2]

efecto del pH sobre la velocidad de reacción.

*Ruiz Hernández Mario

       Grupo: 4QV2                                                                                                                Sección: 1                                                                                Fecha: 18/Mar/2019

Introducción:

De forma general, la velocidad de una reacción catalizada enzimáticamente es proporcional a la cantidad de enzima en la mezcla de ensayo, según:

v = Vmáx [S]/(Km + [S]) = k'[E0]

Vmáx = kcat [E0]

Efecto del pH sobre la actividad enzimática: La actividad de un enzima se ve afectada por el pH al cual se lleva a cabo la reacción. La curva actividad-pH puede ser diferente para cada tipo de enzima. En el caso más general la curva tiene forma de campana. El valor de pH al cual la actividad es máxima se denomina pH óptimo; dicho pH no tiene por qué coincidir con el pH intracelular. La relación entre el pH y la actividad depende del comportamiento ácido-base del enzima y del propio sustrato. Sustrato y enzima (centro activo) pueden contener grupos funcionales ácidos y básicos, siendo su grado de disociación dependiente del pH, lo que determinará, entre otros aspectos, la conformación de la proteína, la capacidad de unión del sustrato al centro activo del enzima (Km) y la capacidad de transformación del sustrato (kcat). Los estudios cinéticos a diferentes valores de pH nos proporcionan información sobre el mecanismo catalítico de los enzimas y la naturaleza de los aminoácidos más directamente implicados en la catálisis.

Objetivos:

• Demostrar que la velocidad de la reacción enzimática es directamente proporcional a la concentración de la enzima.
• Analizar la importancia del pH del medio sobre la velocidad de una reacción enzimática y su efecto sobre el carácter iónico de la enzima y del sustrato.

Resultados:

Tabla 1.-Efecto de la concentración de la enzima:

[pic 3]

Tabla 2.-Efecto del pH:

[pic 4]Discusión:

Todas las enzimas tienen un pH óptimo en el cual su actividad es máxima, al cambiar este valor de pH la actividad disminuye puesto que algunas cadenas laterales de aminoácidos pueden actuar como ácidos o bases débiles, desarrollando funciones críticas en el sitio activo de la enzima o inclusive desarrollando una función estructural de la proteína; por lo tanto, el estudio y determinación de pH óptimo en el cual una enzima tendrá su mayor velocidad de reacción sirve como prueba sobre los pasos específicos de la reacción, además de que es útil para la caracterización de la misma enzima. dentro del proceso experimental se determinó que la invertasa de Saccharomyces cerevisiae trabaja de una mejor manera a un pH cercano al 4.5, lo cual comparado con los datos proporcionados por la literatura, en el cual se indica que su pH óptimo de trabajo oscila entre el 4.5 y 5, indica entonces una correcta determinación del pH óptimo de trabajo de la invertasa , un dato interesante fue su velocidad de reacción encontrándonos en un pH de 7.5, pues está empezó a disminuir paulatinamente su actividad comparada con el paso del pH de 5 a 6.5.

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