El Efecto tóxico del cobre en la especie Donax trunculus a través del ensayo de Retención del Rojo Neutro

UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA

ESCUELA POLITÉCNICA SUPERIOR DE GANDIA

Grado en Ciencias Ambientales[pic 1]

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TRABAJO FINAL DE GRADO

                            Autor/a:

                                             Ivan Morant Pérez

                           Tutor/a:

                                                                 Silvia Laura Falco Giaccaglia

                                     GANDIA, 2015

ÍNDICE

AGRADECIMIENTOS

RESUMEN

ABSTRACT

1. INTRODUCCIÓN        

1.1. INTRODUCCIÓN        

1.1.1. El cobre como contaminante        

1.1.2. Bioensayos de toxicidad        

1.1.3. Bioindicadores        

Donax trunculus        

Donax trunculus en la Comunidad Valenciana        

1.1.4. Biomarcadores        

Estabilidad de la membrana lisosomal – Retención del rojo neutro (RRN)        

1.2. OBJETIVOS        

2. MATERIAL Y MÉTODOS        

2.1. DISEÑO DEL BIOENSAYO        

2.1.1. Recolección de Donax trunculus        

2.1.2. Exposición al cobre        

2.2. SEGUIMIENTO DEL BIOENSAYO        

2.2.1. Calidad del agua        

2.2.2. Alimentación        

2.3. MEDICIÓN DE LOS PARÁMETROS BIOMÉTRICOS DE LAS TELLINAS        

2.4. RETENCIÓN DEL ROJO NEUTRO (RRN)        

2.4.1. Reactivos y soluciones        

2.4.2. Procedimiento        

2.5. TRATAMIENTO ESTADÍSTICO DE LOS DATOS        

2.5.1. Condiciones de aplicación del ANOVA        

2.5.2. Contraste de hipótesis        

2.5.3. Aplicación del ANOVA        

2.5.4. Prueba de Fisher (LSD)        

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN        

3.1. CARACTERÍSTICAS DEL BIOENSAYO        

3.1.1. Calidad del agua        

3.1.2. Biometría de las tellinas        

3.2. ESTUDIO DE  ESTABILIDAD DE LA MEMBRANA LISOSOMAL        

4. CONCLUSIONES        

BIBLIOGRAFÍA        

AGRADECIMIENTOS

El presente trabajo ha sido posible gracias al apoyo de diversos compañeros y profesores. Me gustaría expresar mi más profundo agradecimiento a mi tutora del trabajo Silvia Laura Falco Giaccaglia, por la constante orientación, supervisión y seguimiento durante los meses de la realización del trabajo, mostrando mucha dedicación y comprensión. Gracias también a mi pareja por todo su apoyo.

Muchas gracias a todos.

RESUMEN

El ensayo de retención del rojo neutro se ha utilizado para evaluar la estabilidad lisosomal de las células de las glándulas digestivas como un indicador del estrés por exposiciones al Cu como contaminante ambiental. Se realizaron estudios de laboratorio (bioensayos) para evaluar los efectos del contaminante. Se expusieron bivalvos de  la especie Donax trunculus durante períodos de 7 y 14 días a concentraciones de 2,5 µg Cu/L y 10 µg Cu/L. Los bivalvos presentaron una reducción significativa de la estabilidad lisosomal en comparación con el control de laboratorio en 7 y 14 días de exposición para todas las concentraciones de Cu. Además, la estabilidad lisosomal fue significativamente menor en los individuos expuestos a 10 µg Cu/L, tanto en 7 y 14 días de exposición, con respecto a los expuestos a 2,5 µg Cu/L. Estos resultados nos indican que la estabilidad lisosomal es un buen indicador para el estrés ocasionado por exposiciones a metales pesados como el Cu.

Palabras Clave: Cobre, Donax trunculus, lisosoma, rojo neutro, bioensayo.

ABSTRACT

Neutral red retention assay was used to evaluate the stability of lysosomal digestive glands cells as an indicator of stress by exposure to Cu as a environmental contaminant. Laboratory studies (bioassays) were conducted to evaluate the effects of the pollutant. Bivalve species of Donax trunculus were exposed for 7 and 14 days to concentrations of 2.5 g Cu / L Cu and 10 g / L. Bivalve showed a significant reduction in lysosomal stability compared with laboratory control at 7 and 14 day exposure to all concentrations of Cu. Also, the lysosomal stability was significantly lower in individuals exposed to 10 µg Cu / L, both 7 and 14 days exposure, with respect to those exposed to 2.5 µg Cu / L. These results show that lysosomal stability is a reliable indicator for stress caused by exposure to heavy metals such as Cu.

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