El contenido de las prácticas de microbiología

UNIVERSIDAD DE ORIENTE

NÚCLEO DE ANZOÁTEGUI

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA

Y PARASITOLOGÍA

GUÍA DE PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA

Elaborado por:

Prof. Félix Pacheco.

ABRIL DE 2006

RECOMENDACIONES GENERALES

1.- Para las prácticas de microbiología, los alumnos deben venir provistos de una bata larga, la guía de trabajos prácticos y lápiz para anotaciones.

2.- No se debe comer, ni beber agua o fumar dentro del laboratorio.

3.- Antes y después de realizados los trabajos prácticos, es necesario desinfectar las superficies de las mesas.

4.- Antes y después de iniciar cualquier experiencia, hay que estudiar bien la teoría en que se basa y examinar las operaciones exigidas para alcanzar los resultados esperados. Esta precaución permite separar con anterioridad todo el material exigido en las diversas fases de su realización.

5.- Sobre la mesa de trabajo debe haber recipientes con solución de fenol o cloro para descartar los materiales usados. Sobre el mesón no debe estar sino lo indispensable para el experimento a realizarse.

6.- Por cualquier accidente con cultivos o con material contaminado comuníquelo al personal técnico del laboratorio para que se tomen las medidas necesarias.

7.- Al dejar el laboratorio, todos deben lavarse cuidadosamente las manos con agua y jabón, secándolas muy bien con las toallas de papel que para ello están dispuestas en el salón.

8.- Cuando la práctica haya terminado y se disponen a abandonar el salón, verificar que estén apagados todos los mecheros de gas, cerradas las llaves del agua y los interruptores de la luz,

9.- Todas las actividades académicas son de asistencia obligatoria y el aprovechamiento de las mismas será tomado en consideración en la promoción de los alumnos.

10.- Y sobre todo: orden.

PRÁCTICAS DE MICROBIOLOGÍA

CONTENIDO

PRÁCTICA Nº 1: Acción de agentes físicos y químicos sobre las bacterias.

PRÁCTICA Nº 2: Morfología bacteriana.

PRÁCTICA Nº 3: Cultivo de bacterias.

PRÁCTICA Nº 4: Coloración simple.

PRÁCTICA Nº 5: Técnicas de coloración.

PRÁCTICA Nº 6: Cocos piógenos.

PRÁCTICA Nº 7: Examen bacteriológico de los alimentos.

PRÁCTICA Nº 8: Pruebas bioquímicas para la identificación de las enterobacterias.

PRÁCTICA Nº 9: Urocultivo y antibiograma.

MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA N° 1

ACCIÓN DE LOS AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS

SOBRE LAS BACTERIAS

A.- OBJETIVOS.

Definir los conceptos de desinfección y esterilización.

Mencionar los métodos de esterilización y los diferentes compuestos desinfectantes.

B.- INTRODUCCIÓN.

Los principios básicos de esterilización y desinfección, son de utilidad en el ejercicio de los profesionales de la salud; todos aquellos procesos de instrumentación de pacientes tales como colocación de sondas, de marcapasos e igualmente las intervenciones quirúrgicas locales o en pabellón, requieren de condiciones asépticas para prevenir las infecciones adquiridas durante el acto médico.

Se denomina esterilización al conjunto de procedimientos físicos o químicos que permiten destruir microorganismos patógenos o saprófitos que se encuentran en el interior o en la superficie de los objetos y sustancias. La desinfección es la destrucción de microorganismos por agentes químicos. De los agentes físicos uno de los más empleados es el calor húmedo (ebullición, autoclave). Como agentes químicos tenemos a los desinfectantes (empleados sobre superficies inanimadas: fenol, cloro, HCL) y a los antisépticos (de aplicación sobre la piel y las mucosas: alcoholes, colorantes, sales de metales pesados, jabones).

Los agentes químicos pueden a su vez clasificarse con base a su mecanismo de acción: los que desnaturalizan proteínas (fenol, etanol); los que afectan los procesos de oxidorreducción (KMnO4) y modificando la permeabilidad de la membrana (jabones) entre otros (Ver lectura complementaria N° 1).

C. MATERIALES.

3 Placas de tripticasa soya agar (TSA).

1 Caldo de tripticasa soya (CTS) con E. coli.

1 CTS con Bacillus sp.

1 Tubo de ensayo con fenol al 0,5%.

1 Tubo de ensayo con fenol al 5%.

1 Tubo de ensayo con agua estéril.

3 Tubos de TSA fundidos.

3 Placas estériles.

3 Varillas de vidrio.

4 Gasas estériles.

Alcohol isopropílico.

Solución fisiológica estéril.

D. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA.

D. 1 Efecto de la Temperatura.

a.- Efecto de la Ebullición.

Se proporcionarán cultivos de un microorganismo esporulado (Bacillus sp.) y no esporulado (E. coli), divida la placa de TSA como indica la figura N° 1; tome una muestra del tubo con el asa bacteriológica para el tiempo 0, seguidamente colocar los caldos en agua hirviendo y tomar muestras a los 10, l5 y 30 minutos. Incubar a 37 ° C por 24 horas.

Resultados.

0 min 10 min 15 min 30 min

____________________________________________________________________

E. coli.

Bacillus sp.

b.- Efecto del Autoclavado.

Dividir una placa de TSA y rotular así autoclavado no, autoclavado si, tomar una asada de caldo de E coli y sembrar en el lado del autoclavado no, lleve el tubo de autoclave durante 15 minutos luego siembre en el lado de la placa de autoclavado si, repita la operación simultáneamente para Bacillus sp. Incubar a 37 0 C por 24 horas.

Resultados.

Crecimiento

Autoclavado no Autoclavado si

______________________________________________________

E. coli.

Bacillus sp.

D.2 Agentes Químicos.

a.- Efecto del fenol

...