Enfermedad Diarreica Aguda

Selenito Caldo

Medio de enriquecimiento para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de materiales clínicos, especialmente heces.

Fundamento

Este caldo selectivo favorece el crecimiento de Salmonella spp.

En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe la flora Gram positiva y la mayoría de la flora entérica excepto Salmonella spp. durante las primeras 8-12 horas de incubación.

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Peptona 5.0 Suspender 23 g del polvo en un litro de agua destilada. Mezclar bien y calentar ligeramente hasta su disolución completa. Evite el calentamiento excesivo.

No esterilizar en autoclave.

Distribuir en tubos estériles un volumen no menor a 5 ml. Se recomienda guardar en heladera si no se usa de inmediato.

Lactosa 4.0

Fosfato de sodio 10.0

Selenito de sodio 4.0

pH final: 7.0 ± 0.2

Siembra

-Materia fecal: a un tubo con 10-15 ml de caldo selenito, agregar 1-2 ml de una suspensión de materia fecal.

-Tejido infectado: macerar 1-2 g de tejido en 10-15 ml de caldo selenito, usando una varilla estéril.

-Orina: a un tubo con unos 5 ml de caldo selenito doble concentración, agregar igual volumen de orina.

Incubación

A 35-37 °C, durante 16-24 horas, en aerobiosis.

Luego, subcultivar en medios selectivos: Salmonella Shigella Agar (B02-138-05/06), Hektoen Entérico Agar (B02-110-05/06), Verde Brillante Agar (B02-124-05/06), Mac Conkey Agar (B02-114-05/06).

Resultados

Microorganismos Crecimiento

Salmonella enteritidis ATCC 13076 Bueno

Salmonella typhimurium ATCC 14028 Bueno

Escherichia coli ATCC 25922 Regular-Escaso

Proteus mirabilis ATCC 43071 Regular-Escaso

Limitaciones

-Se aconseja usar el medio el mismo día de la preparación.

-No incubar el medio de cultivo sembrado por mas de 24 horas, debido a que el efecto inhibitorio del selenito disminuye luego de las primeras 6-12 horas de incubación, y además porque no es favorable para la mayoría de las cepas de Salmonella, que pueden no recuperarse.

-La única ventaja de incubar durante 48 horas es el incremento de la recuperación de Salmonella pullorum.

Características del medio

Medio preparado: ámbar claro, traslúcido.

Almacenamiento

Medio deshidratado: a 10-35 ºC.

Medio preparado: a 2-8 ºC.

Presentación

x 100g :Código: B02-120-05 x 500g :Código: B02-120-06

Tetrationato Caldo.

Medio de cultivo utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. a partir de heces, orina, alimentos y otros materiales de importancia sanitaria.

Fundamento

El medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, y carbonato de sodio que neutraliza y absorbe metabolitos tóxicos.

La selectividad está dada por la presencia de tiosulfato de sodio, tetrationato (generado en el medio por el agregado de la solución iodo-iodurada) y sales biliares, los cuales permiten el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa, como ser la Salmonella spp. e inhiben el desarrollo de la flora acompañante.

Para evitar la proliferación de especies de Proteus spp., se recomienda agregar 40 mg/l de Novobiocina, antes de la solución iodada

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Peptona 5.0 Suspender 46 g del polvo en 1 litro de agua destilada. Mezclar vigorosamente y llevar a ebullición. Enfriar a 45°C o menos. Agregar 20 ml de solución iodurada. Mezclar y distribuir 10 ml por tubo, en tubos estériles. No debe calentarse luego de agregar la solución iodada. El medio base puede mantenerse a 4°C , dura varios meses, pero una vez agregada la solución iodada debe usarse en el mismo día.

Sales biliares 1.0

Carbonato de calcio 10.0

Tiosulfato de sodio 30.0

pH final: 8.4 ± 0.2

Solución iodo iodurada

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