Experimentos Adicionales

En los experimentos adicionales, dos cepas, que se cultiva en dos diferentes fuentes de carbono (dextrina y sacarosa), se compararon sus capacidades para la producción de toxinas. la azúcares en cuestión se encuentran antes de ser el más eficaz en la proteína toxina producción (Özkan et al., 1997). El medio de crecimiento contenía diversas cantidades de dextrina y sacarosa para producir relaciones C: N de 20:1 y 30:1 respectivamente.

Por tanto el M 1 2 3 4 5 6 7 8 M-Marker 1-24a h Bti HD500 2 - 24 h Bti ONR60 3 - 30 h Bti HD500 4 - 30 h Bti ONR60 5-48a h Bti HD500 6-48a h Bti ONR60 7 - 72a h Bti HD500 8 - 72a h Bti ONR60 Cry4Ba Cry11Aa Cyt1A 35 cepas, las bandas de proteína toxina (Figuras 3.4) y los pesos húmedos de las células (Tabla 3.2) se midieron a 24 y 48a horas de incubación en cuatro medios diferentes con C: N proporciones de ambos con sacarosa y dextrina...

Tabla 3.2. Efecto de la fuente de carbono, relación C: N y tiempo de incubación en los rendimientos de células (peso húmedo) de Bti HD500 y ONR60 Bti.

En vista de los resultados mostrados en la Figura 3,4, sacarosa resultó ser la elección de la fuente de carbono, 48 h siendo el momento más adecuado de la incubación durante más experimentos

Figura 3.4. Efecto de la fuente de carbono, relación C: N y tiempo de incubación sobre producción de proteínas de cristal por BTI HD500 y Bti ONR60.

3,2. Respuesta de la optimización de superficie

De acuerdo con los principios de la metodología de superficie de respuesta (RSM), es

inevitable para identificar los factores importantes que pueden afectar el rendimiento del producto

drásticamente. Así, el método tiene por objeto el estudio de estos factores en conjunto con

diferentes conjuntos de condiciones que influyen en la respuesta (Cornell, 1990).

Deshacer cambios

En un estudio anterior de Özkan et al. (2003), los factores importantes en Cry4Ba y la producción Cry11Aa protoxina por BTI HD500 se informó de que la temperatura, las concentraciones de Mn y K2HPO4. De acuerdo con los resultados se estudio, los mayores rendimientos de protoxina de Cry4Ba y Cry11Aa se obtuvieron a 50 - 100 mM de K2HPO4. Los efectos beneficiosos de Mn para ambas las proteínas cristalinas sólo se observaron en 10.6 M. También las concentraciones más altas de Cry4Ba fueron a 25 ° C, mientras que la temperatura óptima fue de 30 ° C durante Cry11Aa. El estudio reveló que el C: N fue también un factor importante que se creó como 20:1 para HD500 utilizando sacarosa como fuente de carbono. Tomando en todo los rendimientos de consideración, y Cry4Ba Cry11A fueron seleccionados para ser las respuestas de el método a emplear y [Mn], la temperatura, la relación C: N y [K +] fueron seleccionado para ser los principales factores con posible influencia en las respuestas. Predetermine niveles óptimos de

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