FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA (DESARROLLO DE LA CERVEZA Y CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO)

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PRACTICA N° 2

FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA (DESARROLLO DE LA CERVEZA Y CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO)

1. INTRODUCCIÓN

El crecimiento es el incremento ordenado de todos los constituyentes celulares a lo largo de un determinado tiempo que conducen a un aumento de biomasa y de metabolito. Para que el crecimiento microbiano tenga lugar es necesario un aporte adecuado de nutrientes; Todos los microorganismos tienen requerimientos nutricionales para su correcto desarrollo, tales como carbono, nitrógeno, hidrógeno, Oxígeno, Azufre, Fósforo y diversos minerales para crecer, además de nutrientes especiales, y condiciones adecuadas o óptimas de pH, temperatura, un sistema homogéneo en donde los nutrientes lleguen a cada uno de ellos, y la necesidad o no de oxígeno. Gracias a todos estos requerimientos hacen que el microorganismo se reproduzca y permita identificarlo debido a ese crecimiento único, a partir de eso podemos crear curvas de identificación que las denominamos curva de crecimiento microbiano. Las cuales permiten determinar el tipo de reacción de microorganismo que se necesita para una óptima fermentación.

1. OBJETIVOS

1. Elaborar de la curva de crecimiento microbiano para la levadura Saccharomyces Cerevisiae.
2. Identificar de las variables en una fermentación alcohólica para un proceso discontinuo.
3.  Visualizar del proceso de gemación de la levadura Saccharomyces Cerevisiae.
4. Obtener metabolito primario de una fermentación alcohólica.

1. PARTE EXPERIMENTAL

1. Materiales y Equipos

1. Microscopio                     
2. Portaobjetos    
3. Cubreobjetos
4. Tubos de ensayo
5. Estufa Memmert                     R=(0-250)°C                             A=±0.1°C
6. Balanza Analítica                R= (0-200) [g]                           A=±0.001[g]
7. Fermentador                        R=(0-6) [L]
8. Brixómetro                          R= (0-30) °Brix                         A=±0.1 °Brix
9. Cajas Petri
10. Vasos de precipitación        R=(0-200)[ ml ]                      A=± 50[ ml]
11. Pipetas                                 R= (0-10)[ ml ]                        A=± 0.1 [ml]
12. Reverberos
13. Olla
14. Globos (pequeños y 1 grande)
15. Papel Filtro
16. Embudo

1. Sustancias y Reactivos

1. Agua estéril                H2O(l)
2. Dextrosa                     C6H12O6(s)
3. Sal                              NaCl(s)
4. Saccharomyces cerevisiae
5. Lúpulo
6. Azúcar                 C6H12O6(s)

1. Procedimiento

1. Parte A: Observación de levaduras al microscopio

1. Preparar una mezcla con una pizca de levaduras, una cucharada de agua tibia y una pizca de azúcar.
2. Dejar reposar 5-10 minutos.
3. Colocar sobre el portaobjetos y cubrir con el cubreobjetos.
4. Observar bajo el microscopio con un objetivo de fuerte aumento.
5. Dibujar lo que se observa.  Nota: en caso de no poder observar claramente se debe probar alternativas para mejorar el preparado, por ejemplo, variando la cantidad de levadura que se coloca en la muestra.

1. Parte B:Preparación de la cerveza

1.  Preparación del mosto.

1. Colocar la malta molida en 5 litros de agua y llevar a calentamiento a 73 °C,  a su vez colocar 5 litros de agua y calentarlos en otra olla.
2. Mantener la suspensión  de la malta una temperatura promedio de 67 ° C durante 45 minutos, agitándola lentamente cada minuto.
3.  Colocar 10 g de lúpulo al inicio del calentamiento ; y al final colocar 10 g de lúpulo al final del calentamiento
4. Filtrar la preparación
5. Enfriar en una cama de hielo por el tiempo necesario hasta alcanzar la temperatura ambiente  

1.  Parte C: Fermentación

1. Colocar el mosto en una botella de plástico, evitando el contacto con el aire.
2. Tomar pequeñas muestras del mosto y colocarlas en cajas Petri, pesándolas. Además de una muestra muy pequeña medir los grados BRIX durante el día de preparación, a cada hora.
3. Dejar reposar a las muestras  en la incubadora a una temperatura de 65 °C por un día.
4. Registrar el peso de las cajas Petri, después del proceso de incubación.
5. Colocar el globo en la entrada de la botella y dejar fermentar de 2 a 5 días.

1.  Parte D: Embotellado

1.  Agregar 2 cucharas de dextrosa a cada botella que se va a envasar.
2.  Filtrar la cerveza con papel filtro y dejarlas reposar durante una semana.
3. Colocar las botellas en la refrigeradora y enfriar hasta la temperatura más baja que sea posible.

1.  DATOS

1.  Datos Experimentales

Tabla 4.1.-1

Datos de los pesos de las muestras

1. Datos adicionales

Tabla 4.2.-1

Propiedades del sustrato

Fuente: Datos analizados antes de inoculación en el Laboratorio de Biotecnología

Tabla 4.2.-2

Condiciones óptimas de la Saccharomyces Cerevisiae

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