FROTIS SANGUINEO MANUAL DE PROCEDIMIENTO

1.   OBJETIVO

Realizar un extendido delgado y uniforme para posteriormente teñirlo para poder apreciar sus constituyentes.

2.   ALCANCE

ALCANCE: Para el personal de salud (Hospitales de 2° y 3° nivel, centros de salud, laboratorios públicos y privados, etc.). CAMPO DE APLICACION: Exclusivamente sangre entera con anticoagulante EDTA de preferencia y sangre periferica

3.   RESPONSABLES

El profesional Bioquímico, técnicos en laboratorio clínico.

4.   DEFINICIONES

EXTENSION SANGUINEA.- La práctica de una extensión sanguínea es de gran importancia en hematología, ya que muchas hemopatías se diagnostican con solo observar las características morfológicas de las células circulantes. Por ello, la calidad de la extensión debe ser impecable y, debido a que constituye siempre un medio para controlar la presencia de eventuales alteraciones sanguíneas detectadas  mediante los autoanalizadores, es muy recomendable realizarla en la misma cabecera del enfermo y, a ser posible con sangre sin anticoagulante. Ello obedece a que tanto el tiempo como la naturaleza del anticoagulante ejercen un efecto directo sobre la morfología celular, induciendo la aparición de artefactos (polinucleares neutrófilos y monocitos principalmente) o alterando la distribución de las células (sobre todo las plaquetas). Aunque técnicamente la realización de la extensión es muy simple, la obtención de un espécimen ideal, es decir que no sea excesivamente grueso ni fino, requiere cierta práctica. Es muy conveniente resaltar que, en cualquier caso la calidad de la extensión es decisiva para poder apreciar la morfología eritrocitaria y muy importante para efectuar el recuento diferencial de leucocitos o formula leucocitaria.

METODOS

1. Método manual (método de los dos portaobjetos o de  los realizados con cubreobjetos).
2. Mecanismos automatizados  o automáticos.

5. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO

METODO MANUAL

FUNDAMENTO

La técnica de realización del frotis se realiza mediante un movimiento por desplazamiento. El extendido debe ser impecable  ni  fino  ni  grueso,  con  ello  se  conseguirá     una

región inmediata al punto de partida de la extensión, en ella se aprecia un aumento de los linfocitos.

1. Cuerpo (Zona ideal): Corresponde a la región intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de las células.
2. Cola (Zona excesivamente fina): corresponde al final de la extensión y termina con un área donde las células adoptan una disposición acordonada, en esta región existe un exceso de granulocitos y monocitos.

RECOMENDACIONES

• Si se usa EDTA como anticoagulante, se debe realizar el frotis en las 2 primeras horas de extraída la muestra.
• El grosor del extendido dependerá de la rapidez y el ángulo.
• Si se aplica mucha fuerza entre el cubreobjetos y portaobjetos se produce hemólisis y equinocitos (Crenocitos).
• Los frotis elaborados con cubreobjetos salen más finos y uniformes (dejan márgenes a los bordes), en caso de no disponerse de los mismos puede emplearse portaobjetos de bordes muy rectos y biselados.
• Debe ser más angosto y más corto que el portao0bjetos, regular, sin escotaduras ni agujeros, sin flecos ni escotaduras.

BIOSEGURIDAD

• Todo el material utilizado debe ser desechado o depositado en un recipiente de agua con hipoclorito de sodio (lavandina) al 0.5%.
• Para el desarrollo de trabajo utilizar barreras de protección (guantes, barbijo, lentes).

6. FORMULARIO Y REGISTROS

Los Resultados serán registrados en el cuaderno de laboratorio del área de hematología, y en los respectivos formularios.

7.   REFERENCIAS

• Guía        práctica   de   técnicas   de  hematología  (Sara Villafán Sandi).
• Manual de técnicas de laboratorio en hematología (Joan Lluis Vives, Joseph Lluis Aguilar).
• Manual de procedimientos técnicos de la red Nacional de Hematología.
• Manual de Laboratorio de Hematología Clínica INLASA