Fisiología vegetal “Ensayo de técnicas moleculares”

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Fisiología vegetal

“Ensayo de técnicas moleculares”

Karen Y. Salazar García

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La biología molecular es un área de la biología referida al proceso de la transcripción del gen para rendir el ARN, la traslación del ARN en las proteínas y el papel juego de esas proteínas en la función celular. (Vallejo, 2014)

Desde 1960, científicos diversos han desarrollado métodos para determinar, para aislar, y para manipular componentes moleculares en células incluyendo la DNA, el ARN, y las proteínas. En la fisiología vegetal es de vital importancia la utilización de estas técnicas ya que con ellas se pueden estudiar para poder aplicar en él un campo desde saber la secuencia de DNA hasta poder extraer una proteína o enzima que ayudaría a el crecimiento o inmunidad hacia una plaga, por ejemplo. Todas estas técnicas son nacidas ante la necesidad de conocer mejor el funcionamiento de las plantas para poder predecir lo más exactamente posible su respuesta ante cualquier manipulación genética o perturbación ambiental.

Para que estas técnicas mencionadas más adelante tengan el éxito esperado y cumplan con los resultados esperados se necesitan tomar las características tanto morfológicas como fisiológicos de dichas muestras en este caso de carácter vegetal.

Las técnicas más utilizadas actualmente son:

Reacción en cadena de polimerasa (PCR) - éste es una de las técnicas más importantes usadas en biología molecular y se utiliza básicamente para copiar la DNA. La polimerización en cadena permite que una única serie de la DNA sea amplificada en millones de moléculas de la DNA. La polimerización en cadena se puede también utilizar para introducir mutaciones dentro de la DNA o para introducir sitios especiales de la enzima de la restricción. Además, la polimerización en cadena se utiliza para determinar si cierto fragmento de la DNA existe en una biblioteca del cDNA. Diversos tipos de polimerización en cadena incluyen la polimerización en cadena reversa de la transcripción (RT-PCR) para la amplificación del ARN y la polimerización en cadena cuantitativa (QPCR) para medir la cantidad de presente del ARN o de la DNA. (CIGRAS. FACULTAD DE CIENCIAS AGROALIMENTARIAS, 2006) .La PCR es la técnica más importante en la biología molecular porque con ella se ha logrado la simplificación e innovación de muchas técnicas moleculares que permiten abordar nuevas líneas de investigación en diferentes ramas de la ciencia como biotecnología, ecología, evolución, biología de la conservación, arqueología, patología, medicina forense, entre otras.

Reproducción de la expresión - esta técnica ayuda a científicos a entender la función de la proteína. La DNA que cifra para una proteína determinada se reproduce o se copia usando la polimerización en cadena en un vector de la expresión llamado un plásmido. El plásmido se introduce a una célula animal o a una célula bacteriana. Este plásmido tiene elementos del promotor que puedan estimular la alta expresión de la proteína deseada para poder entonces examinar su actividad enzimática. (Iglesias, 2008)

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