Flora Ambiental Y Humana

INTRODUCCION

Este laboratorio consistió en sembrar distintos tipos de microorganismos presentes en muestras tomadas del ambiente y del hombre; con el fin de poder analizar la formación de colonias de microorganismos y las características de cada una de ellas.

Para que este crecimiento se dé fue necesario generar condiciones adecuadas de temperatura y nutrientes que facilitan el crecimiento de los organismos sembrados. La importancia de realizar trabajos de este tipo radica en que podemos identificar y clasificar el tipo de microorganismos que habita en cada sitio de donde se obtienen las muestras.

OBJETIVOS

• Identificar microorganismos presentes en muestras de ambiente y humanas.

• Caracterizar de manera macroscópica cada colonia obtenida (Bacteria, hongo, levadura) y poder clasificarlas según su forma, su tonalidad, su superficie, entre otras.

• Observar de manera microscópica cada especie de organismos obtenidos y poder relacionarlos entre sí.

• Reconocer los procesos necesarios para realizar la tinción de Gram y reconocer su importancia.

• Identificar la manera por la cual se describen las observaciones de cada medio de cultivo.

METODOLOGIA

Para la realización de la práctica se requirió el uso de los siguientes materiales:

• Materiales:

 Beaker

 Estufa

 Microscopio

 Laminas – laminillas

 Cajas de Petri

 Cinta de enmascarar

 Hisopos

• Reactivos:

 Agar agar

 OGY

 Platecount agar

 Safranina

 Azul de metileno

 Alcohol cetona

 Lugol

PROCEDIMIENTO:

Se inicio preparando medios de cultivo Agar agar, PCA y OGY. Luego se sirvieron en cajas de Petri de la siguiente manera:

Medio de cultivo Cantidad de cajas de Petri

PCA 4

Agar agar 2

OGY Agar 2

Con cinta de enmascarar se marco cada caja de Petri con el tipo de medio de cultivo, el número de curso y los integrantes del grupo. Se llevaron las cajas de Petri a autoclave, para su esterilización.

Luego de haber esterilizado los medios de cultivo se sembró cada caja de Petri con muestras tomadas de la siguiente manera: Fig. 01 Medios de cultivo antes de ser sembrados

Medio de cultivo Muestra extraída de:

Agar agar Ambiente

Suelo del laboratorio

OGY Agar Ambiente

Levadura

PCA Humana

Balanza

Ambiente

Levadura

 Para las muestras humanas se realizo un frotis con un hisopo húmedo con agua destilada en zonas como el cuello o los oídos, para luego esparcir la muestra sobre el medio de cultivo.

 Para muestras tomadas del ambiente se destaparon las cajas de Petri y se permitió el libre circulamiento del aire sobre ellas.

 Para la muestra de levadura se debió diluir la levadura en agua para luego poder esparcirla sobre el medio de cultivo con ayuda de un hisopo en forma de zigzag.

Fig. 02. Levadura diluida para luego ser sembrada

 Por último las muestras que tomamos del suelo o de la balanza se obtuvieron pasando el hisopo humedecido en agua destilada sobre la superficie para luego esparcirla sobre el medio de cultivo, también en forma de zigzag.

Por último se dejaron los medios de cultivo a encubar a temperatura ambiente y otros a 37°c; todos durante 5 días.

• DETERMINACION DE FLORA AMBIENTAL Y HUMANA:

Luego de haber obtenido un notable crecimiento bacteriano en cada una de las cajas de Petri se procedió a realizar una identificación macroscópica y microscópica de cada uno de los organismos presentes en el medio de cultivo.

Observación macroscópica:

Se describió cada organismo según su forma, superficie, color, elevación, borde y textura. Esta información se agrupo en forma de tabla para su posterior análisis.

Observación microscópica:

Para la observación microscópica fue necesario tomar pequeñas muestras de bacterias para realizar tinción de Gram.

Luego de esto estas muestras se observaron al microscopio, para su posterior análisis.

RESULTADOS

Luego de los cinco días transcurridos se observo notoriamente el crecimiento bacteriano, pero especialmente el de los hongos y las levaduras. Para el análisis de estas muestras obtenidas realizamos un cuadro en el cual relacionamos las observaciones macroscópicas de cada medio de cultivo; el cuadro es el siguiente:

MEDIO DE CULTIVO MUESTRA FORMA BORDE ELEVACION SUPERFICIE CECIMIENTO

PCA Ambiente

(contaminada) Filamentosa Filamentoso Acuminada Rugosa, brillante, cremosa, invasiva. Hongos, algunas levaduras, pocas colonias de bacterias.

PCA Levadura (contaminada) Irregular Entero Elevada Lisa, brillante, seca, invasiva. Levaduras, sobre estas varias colonias de bacterias.

PCA Persona Circular Entero Elevada Rugosa, brillante, cremosa, superficial. Hongos sin filamentos (en etapa de crecimiento). Hongos filamentosos, colonias bacterianas y hongos no filamentosos.

PCA Balanza Filamentosa Filamentoso Acuminada Rugosa, mate, seca, invasiva. Hongos, en el interior se observa una levadura.

AGAR AGAR Piso No se observo crecimiento

AGAR AGAR Ambiente Circular Entero Plana Rugosa, brillante, cremosa, superficial. Algunas colonias bacterianas poco visibles.

OGY ambiente Irregular Filamentoso Elevada Rugosa, brillante, cremosa, superficial. Hongos filamentosos (en su mayoría), hongos no filamentosos, y algunas colonias bacterianas.

OGY Levadura Irregular Entero Plana Lisa, brillante, seca, superficial. Solo levadura.

Cuadro 01. Observación macroscópica de cada una de las colonias obtenidas

Algunas observaciones para cada una de las muestras son las siguientes:

PCA:

1. Levadura:

Observación: Se puede observar una gran formación de colonias bacterianas de color amarillo sobre las levaduras.

2. Ambiente:

Observación: Se puede observar un gran hongo de color blanco que ocupa casi todo el espacio dentro de la caja de Petri, sin embargo a su alrededor crecieron algunas levaduras y pocas colonias

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