Frotis de sangre

FROTIS DE SANGRE

MATERIAL

• Microscopio

• Portas y cubre-objetos

• Soporte de preparaciones

• Cubeta

• Lanceta

• Alcohol

• Metanol

• Giemsa

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PROCEDIMIENTO

1.- Limpiar el pulpejo del dedo con una gota de alcohol, hacer una punción para conseguir una gota de sangre.

2.- Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien limpio.

3.- Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace un frotis o extensión de sangre.

4.- El porta con el que se hace la extensión debe deslizarse bien colocado y lo más perfectamente aplicado en su borde contra el otro porta sobre el que se hace la extensión. Sólo debe pasarse una vez, de forma continua e ininterrumpida.

5.- Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar para la tinción la mejor lograda.

6.- Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo más rápidamente posible. La desecación se facilita con movimiento en forma de abanico, nunca soplando o por calor. La rápida desecación evita la deformación de los glóbulos sanguíneos.

TECNICA DE TINCIÓN

1. Depositar el porta con la extensión de sangre encima del soporte de tinciones y éste sobre la cubeta.

2. Dejar caer sobre la extensión unas gotas de metanol y esperar que el alcohol se evapore, con lo que se consigue el fijado.

3. Depositar cubriendo toda la extensión, unas gotas de Giemsa, evitar la desecación y dejar actuar el colorante unos cinco minutos.

4. Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el colorante.

5. Tomando el porta por los cantos secar aireando el porta, o bien al calor muy lento de la llama del mechero.

OBSERVACION AL MICROSCOPIO

1. Con débil aumento explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis es más perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos más fuertes.

2. En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos , teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia de núcleo. Hay varias clases de glóbulos blancos:

o los linfocitos algo mayores que los glóbulos rojos, con un núcleo muy voluminoso que ocupa casi todo el glóbulo, aparece fuertemente teñido en color violeta oscuro.

o los monocitos son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, hay que desplazarse por la preparación para encontrar alguno. Tienen un núcleo muy grande y redondeado que aparece

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