Fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativo

Fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativoLos fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredescelulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativasLa pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa depeptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la carainterna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra elácido lipoteicoico, y más en la superficie, el ácido teicoico que está ancladosolamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada,y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (decomposición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capadelgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior por lipoproteínas. Lamembrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estasdiferencias constitutivas de su pared. La clave es el peptidoglicano, ya que esel material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Grampositivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas.La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloración, se debe a quela membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos,como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La capa de peptidoglicano queposee es demasiado delgada como para poder retener el complejo de cristalvioleta/yodo que se formó previamente, y por lo tanto este complejo se escapa,perdiéndose la coloración azul-violácea. Pero por el contrario, las Grampositivas, al poseer una pared celular más resistente y con mayor proporciónde peptidoglicanos, no son susceptibles a la acción del solvente orgánico, sinoque este actúa deshidratando los poros cerrándolos, lo que impide que puedaescaparse el complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloración azul-violácea.

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