GUÍA DE MICROSCOPIA

ASIGNATURA: LABORATORIO CLÍNICO I

Código: 504115

Horas semanales: 2

Componente: Teórico Práctico

Ubicación: I semestre                

Requisitos: Ninguno        

GUIA N° 1

GUÍA DE MICROSCOPIA

INTRODUCCIÓN

Con el nombre de microscopio (del griego micro = pequeño y skopein = observar) nos referimos a todo instrumento que nos permite visualizar y estudiar aquellas estructuras cuyo tamaño se sitúa por debajo del nivel de resolución del ojo humano es decir por debajo de las 250 µm, el microscopio es un instrumento óptico que aumenta la imagen de los objetos y en los últimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de las investigaciones biológicas y se ha convertido en un instrumento básico para abrir nuevas fronteras en la vida. La lupa puede considerarse como el microscopio más simple y fue usado inicialmente por algunos investigadores para adquirir los primeros conocimientos del mundo microscópico, posteriormente ésta se perfecciono y en la actualidad existen varios tipos de microscopios, algunos de ellos altamente especializados por una gran variedad de usos.

Los Holandeses Anton Van Leeuwenhoek, Hans y Zacharias Jansen fueron los  contribuyeron significativamente al desarrollo de la microscopia a principio del siglo XVII. Leeuwenhoek fue uno de los primeros en dejar constancia de sus observaciones describiendo bacterias, protozoarios, glóbulos rojos y espermatozoides.

El microscopio al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la estructura interna de las células, tejidos y organismos, hacer mediciones y estimar el tamaño de una población de microorganismos.

NECESIDAD

Que los estudiantes adquieran destrezas en el manejo del microscopio y su aplicación en los diferentes tipos de muestras para establecer un buen diagnostico.

OBJETO DE ESTUDIO

Microscopio    

OBJETIVOS LA PRÁCTICA

• Conocer las diferentes partes del microscopio compuesto y sus respectivas funciones
• Aprender a manejar correctamente el microscopio
• Hacer el montaje de placas temporales
• Observar muestras en el microscopio
• Determinar el tamaño del campo visual del microscopio
• Adquirir destreza para calcular las medidas de estructuras celulares, células y organismos
• Reconocer la importancia del microscopio en el desarrollo de las ciencias

COMPETENCIAS A ADQUIRIR POR LOS ESTUDIANTES

• Aplicar las nomas de bioseguridad necesarias para los montajes de las muestras a observar en el microscopio
• Identificar el objetivo correcto según el tipo de muestra

MATERIALES DE LABORATORIO

• Microscopio compuesto
• Portaobjetos
• Cubreobjetos
• Aceite de inmersión
• Placas coloreadas
• Muestras biológicas
• Palillos
• Goteros
• Solución salina o agua destilada
• Materiales de  bioseguridad (bata, guantes, tapa boca, gorro).

PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO Y SUS FUNCIONES

SISTEMA OPTICO

• Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.
• Objetivo: lente situada en el revólver. Amplía la imagen de la preparación.
• Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
• Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
• Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

SISTEMA MECANICO

• Soporte: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.

• Revólver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro.

• Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico que aproxima el enfoque y el micrométrico que consigue el enfoque correcto y le da nitidez a la imagen enfocada.

• Platina: lugar donde se deposita la preparación.

• Cabezal: contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular o binocular.

PROCEDIMIENTO

Empleo del objetivo de 10x y 40x

• Colocar el objetivo de menor aumento(4x) en posición de empleo y bajar la platina

• Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas
• Comenzar la observación con el objetivo de 4x ( ya en posición) o colocar el de 10x
• Para realizar el enfoque acercar al máximo la lente del objetivo (10x) a la preparación, empleando el tornillo macrometrico, baje el condensador y cierre el diafragma Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguna de ellas o ambos.
• Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macrometrico y cuando se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.

• Pasar al siguiente objetivo (40x), subir hasta la mitad el condensador y abrir hasta la mitad el diafragma, la imagen debería estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar el objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior (10x) y repetir la operación. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las preparaciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.

EMPLEO DEL OBJETIVO DE INMERSIÓN (100X)

• Después de haber realizado el enfoque inicial con el objetivo de 10x para escoger el mejor campo de lectura, girar el revolver dejándolo a medio camino entre este  y el de 100x
• Abrir completamente el diafragma para ver claramente el circulo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite de inmersión
• Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el circulo de luz
• Terminar de girar suavemente el revolver por el lado del objetivo de 4x hasta la posición del objetivo de inmersión 100x
• Subir el condensador
• Enfocar cuidadosamente con el micrómetro, la distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima aun menor que con el objetivo de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande
• Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo de 40x sobre esta zona pues se mancharía de aceite.

• Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación.

Estructuras más comunes en preparaciones en fresco.

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