Hibridacion Somatica

Degradación enzimatica de DNA:

ADNasa I endonucleasa de E. Coli:

Es una endonucleasa que corta los enlaces de fosfodiester, donde el enlace es proporcionado por el nucleotido de Pirimidina.

Actua sobre DNA de cadena simple, doble cadena.

Exonucleasa III de E. Coli:

Son enzimas que catalizan la eliminación de nucleotidos, rompiendo los enlaces de fosfodiester, de los extremos de 3’ a 5’.

Posee 4 actividades catalíticas:

-Actividad exodeoxiribonucleasa 3’ a 5’, la cual es específica para ADN doble cadena

-Actividad RNAsa

-Actividad 3’ fosfatasa

-Actividad endonucleasa de tipo AP (más tarde llamada actividad endonucleasa de tipo II).

Lambda exonucleasa:

Son exonucleasa que corta los enlaces de fosfodiester en dirección de 5’ a 3’; formando nucleocidos 5’

Nucleasa S1 (endo, exo):

Es una endonucleasa que catalina la ruptura de cadena simple de DNA y RNA, en oligo o mononucletidos

Nucleasa Bal 31:

Es una exonucleasa que degrada tanto los extremos 3’ y 5’ del DNA, sin generar intermedios, La enzima es también una endonucleasa de cadena sencilla altamente específica que escinde en mellas, las lagunas y las regiones de una sola cadena de ADN y ARN dúplex.

ARNasa H (ribonucleasa H):

Es una endonucleasa, que hidroliza específicamente los enlaces de fosfodiester de RNA que se híbrida con DNA. No digiere DNA de doble o simple cadena.

ARNasa A (ribonucleasa A):

Es una endonucleasa que ataca al fosfato 3’ de la Pirimidina. sus sustrato es el DNA de simple cadena.

ARNasa T1 (endo):

Es una endoribonucleasa que degrada específicamente RNA de cadena simple en los residuos G.

Corta los enlaces de fosfodiester entre los residuos de 3’ guanicilo y el 5’-OH de nucleotidos adyacentes

Exorribonucleasa:

Es un enzima que degrada el RNA, removiendo los nucleotidos terminales, en dirección de 5’ a 3’ o viceversa de la molécula de RNA.

Ribozimas:

Son moleculas de RNA con actividad catalítica, su sustrato es el RNA-inmaduro. Participa en la eliminación de los intrones.

DNA polimerasa I de E. Coli:

Interviene en la replicacion del DNA, lleva a cabo la síntesis de una nueva cadena de DNA.

Fragmento de Klenow de DNA polimerasa I de E. Coli.:

Es un fragmento proteico de gran tamaño, que pertenece a la DNA polimerasa I, la cual se puede separar de la DNA polimerasa I. Puede tener dos funciones:

-Mantiene la actividad de la polimerasa de 5’ a 3’

-Actividad exonucleasa de 3’ a 5’

DNA polimerasa de bacteriofago T7 y la secuenasa:

Taq polimerasa:

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