INFORME LABORATORIO N°1 “APRENDIENDO A USAR EL MICROSCOPIO Y MICROPIPETAS”

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PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CHILE FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR BIOLOGÍA DE LA CÉLULA BIO-141C

INFORME LABORATORIO N°1

“APRENDIENDO A USAR EL MICROSCOPIO Y MICROPIPETAS”

Alumnas:

María Aguilera

Carolina Ahumada

Elisa Becerra

Sección:

1A

Profesor:

Dr. Enrique Brandan

Fecha de Entrega:

21 de Marzo del 2017

INTRODUCCIÓN

Desde que existe la humanidad, la creación y uso de los avances tecnológicos para cada época han sido fundamentales para comprender y analizar diversos tópicos de la vida.

Cuando se creó el primer microscopio en 1608, fabricado por Zacharias Jansen, éste estaba compuesto por dos lentes convergentes, el cual más tarde fue utilizado por Robert Hooke en 1665 para estudiar cortes de corcho y describir las pequeñas celdas a las que llamó “células”. Este microscopio fue empleado por diversos científicos renombrados, los cuales lo utilizaron para observar variadas estructuras, sin embargo, estaban limitados a conocer sólo su forma pero no su función, debido a su escasa capacidad de aumento y resolución.

Con los años la herramienta conocida como microscopio fue evolucionando hasta convertirse en el principal instrumento de estudio en muchos ámbitos de la ciencia, debido a los avances tenemos a nuestra disposición una gran variedad de microscopios y otros elementos como las micropipetas que a su vez han ido perfeccionándose para satisfacer las múltiples necesidades que pueden surgir a la hora del estudio y la investigación, por ejemplo para el trabajo práctico realizado el dia 7 de marzo del presente año, el artefacto empleado fue el que se conoce como microscopio óptico o de luz, el cual fue clave, junto con las micropipetas P1000 y P200 para desarrollar los objetivos requeridos en la actividad.

OBJETIVOS

El objetivo general se basa en comprender los aspectos necesarios para poder utilizar el microscopio de luz y las micropipetas. Los objetivos específicos, consisten en analizar la estructura y mecanismo de funcionamiento del microscopio de luz a través de la visualización de diversas muestras con y sin tinción y en adquirir destreza en la utilización de micropipetas para la medición de absorbancia de las soluciones con rojo fenol mediante el espectrofotómetro.

METODOLOGÍA

Para resolver la primera parte del trabajo práctico se utilizó un microscopio marca Olympus y se analizó las 3 muestras, las cuales consistían en tres letras del abecedario, en los objetivos 10x, 20x y 40x. Para cambiar de objetivo se giró el revólver en dirección de las manecillas del reloj. Para ajustar el portaobjetos en el objetivo se manipuló las perillas coaxiales de movimiento x-y de la platina, y para obtener la resolución deseada de la muestra se manipuló las perillas coaxiales de enfoque macro y micrométrico. En la segunda parte, se realizó un frotis de mucosa oral, el cual se observó en primera instancia sin tinción y posteriormente para dar contraste, la muestra se tiñó con azul de metileno y se cubrió con un cubreobjetos.

Para resolver la segunda parte del trabajo práctico se utilizó dos tipos de micropipetas, P1000 y P200, con estas se midió y preparó 6 soluciones distintas en tubos eppendorf. La primera solución constó de 1000µL de H2Od, la segunda solución de 900µL de H2Od y 100µL de rojo fenol, en la cual se ocupó la P200 para verter el rojo fenol, la tercera solución constó de 700µL de H2Od y 300µL de rojo fenol, la cuarta solución de 500µL de H2Od y rojo fenol respectivamente, la quinta de 250µL de H2Od y 750µL de rojo fenol y la sexta sólo de 1000µL de rojo fenol. La mezcla de líquidos se hizo con la P1000 dentro del tubo eppendorf y luego se traspasó cada solución a una cubeta limpia, la cual se colocó en el espectrofotómetro previamente calibrado con agua destilada, el cual midió la absorbancia de cada solución a una longitud de onda de 560 nm.

DESARROLLO EXPERIMENTAL

Al comienzo de la actividad se observó bajo el microscopio cada portaobjetos con su respectiva letra. Primero se utilizó el objetivo 10X con el cual fue necesario realizar una elevación de la platina con la cremallera para acercar el objeto al objetivo. Posteriormente se manipularon las perillas coaxiales para desplazar la platina

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