Laboratorio De Microobiolgia

1. Tema: MEDIOS DE CULTIVO

2. Problema.-

Todo examen bacteriológico incluye el cultivo del producto a examinar. Es necesario para hacer más evidente la presencia de bacterias tomando en cuenta la cantidad de microrganismos para observar por un simple examen de microscopio. Preciso para el aislamiento y separación de las distintas especies bacterianas presentes en un producto patológico. Nos permite identificar bacterias aisladas y estudiar la sensibilidad de las bacterias a los distintos antibióticos.

3. Objetivo General.-

Conocer los diferentes medios de cultivo para tener éxito en nuestra investigación

4. Objetivos Específicos (tres) o Tareas a ejecutar

• Diferenciar los distintos medios de cultivo

• Determinar los requerimientos que necesitan las bacterias para su desarrollo

• Identificar el medio y las condiciones adecuadas para el crecimiento y desarrollo de microrganismos

5. Justificación

La bacteriología ciertamente no podría concebir sin la existencia de un medio de cultivo.

La preparación de los medios de cultivo esta hoy ciertamente facilitada por la existencia de productos en el comercio de medios deshidratados o incluso listos para su empleo inmediato.

La mayoría de las bacterias patógenas requieren nutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de estractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes

6. Marco teórico

REQUERIMIENTOS PARA EL DESARROLLO BACTERIANO.-

Las bacterias pueden ser divididas en autótrofas y heterótrofas. Las primeras comprenden las bacterias del suelo y del agua que obtienen carbón y nitrógeno de la atmosfera y de la materia inorgánica simple. Las bacterias heterótrofas requieren elementos orgánicos mas complejos como fuente de carbón y nitrógeno, así como proteínas y sus derivados, también requieren carbohidratos y grasas. Este ultimo grupo de organismos es el mas importante en bacteriología medica.

Proteínas.- son adquiridas generalmente como peptonas que se encuentran disponibles, en el comercio, preparadas por digestión parcial de carnes con enzimas pépticas, consiste en polipeptidos, dipeptidos y aminoácidos.

Carbohidratos.- suministran carbón para la síntesis y además su fermentación libera energía utilizable en el metabolismo

Factores accesorios de crecimiento.- son también adquiridos por algunas bacterias, entre ellas están las vitaminas el complejo B. estas suministran enzimas necesarias que las bacterias son incapaces de sintetizar. Otros factores necesarios para algunas bacterias son obtenidas de nutrimentos mas complejos como suero, la sangre, la yema de huevo, etc.

Sales minerales.- elementos como potasio, sodio, calcio, etc. También son requeridos por algunas bacterias en su desarrolló.

Atmosfera.- algunos microrganismos precisan de una atmosfera con oxigeno para su desarrollo (aerobio obligados) otros son incapaces de producir en presencia de oxigeno libre (anaerobios obligados) en tanto, que los de un tercer grupo aunque pueden crecer en la atmosfera con oxigeno logran sobrevivir y crecer sin el (anaerobios facultativos).

Presión osmótica.- las cuales pueden encogerse y ser destruidas (plasmólisis) en soluciones hipertónica; inversamente se rompen (plasmoptisis) por entrada de agua, en soluciones hipotónicas.

Temperatura.- la temperatura en la que el microrganismo bacteriano crece mejor es considerada como temperatura optima.

Luz.- la mayoría de las bacterias se desarrollan mejor en ausencia de luz. La luz del sol como componente ultravioleta puede incluso ser letal.

Reacción.- la mayoría de la bacterias crece mejor en un medio ligeramente alcalino pro existe también un limite de potencialidad bastante amplio. Los hongos crecen con facilidad medios ácidos mientras que en el medio especial para el crecimiento del Vidrio cholorae debe ser marcadamente alcalino.

ESTERILIDAD DEL MEDIO

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante)

SEGÚN SU ESTADO FÍSICO (CONSISTENCIA).

1) Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtención de una suspensión bacteriana de una determinada concentración.

2) Medios sólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregándoles un agente gelificante. Los más utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es una proteína animal obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de que es hidrolizada por muchas bacterias, y además su uso está muy limitado porque su punto de fusión es bajo (licúa a temperatura ambiente) razón por la que no puede utilizarse para cultivos a 37ºC, que es la tempera óptima de crecimiento para muchos microorganismos. Agar-agar:Es un polímero de azúcares obtenido de algas marinas. Se trata de una molécula insoluble enagua pero soluble en agua caliente; una solución al 1,5% p/v forma un gel firme entre 32 y 39ºC y nose funde por debajo de 85ºC. Funde a 90ºC y solidifica una vez fundido alrededor de los 45ºC. Tiene el inconveniente de que introduce compuestos orgánicos indefinidos que pueden falsear los resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo. Aunque el agar es una mezcla de polisacáridos, Araki, en 1937, los dividió en dos grupos:- agarosa, con poco sulfato, libre de ácido pirúvico, y- agaropectina, con mucho sulfato y gran cantidad de cenizas. La proporción de agarosa a agaropectina en el agar varía según el alga de origen. El agar puede utilizarse para diferentes fines, aunque los más importantes son: agar comercial para la industria alimenticia, agar bacteriológico, agares purificados y agarosa, utilizada para electroforesis en gel. Aproximadamente la mitad de todo el agar que se produce, se utiliza en trabajo microbiológico, por lo que es importante la ausencia de metales tóxicos.

3) Medios semisólidos:

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