Laboratorio N°2: “Metabolismo de carbohidratos. Fermentación”

Laboratorio N°2:

“Metabolismo de carbohidratos. Fermentación”

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Objetivos:

• Integrar y aplicar conocimientos de metabolismo
• Comparar las distintas cinéticas de fermentación utilizando diferentes sustancias.
• Observar experimentalmente los fenómenos de respiración celular anaeróbica (fermentación) en levaduras.

Introducción:

Los carbohidratos son moléculas esenciales para la vida debido a que estas son las principales moléculas para el aporte de energía, esto gracias a su fácil metabolismo. Sabiendo esto lo siguientes que deberíamos saber también es que, el principal nutriente celular es la glucosa, la que es catabolizada para producir ATP, la cual es la moneda de energía utilizable en la célula. Ya que en presencia de oxigeno ocurre respiración celular aeróbica en donde el piruvato se va a incorporar a la mitocondria para así transformarse en acetil Coa. El cual origina CO2 y coenzimas reducidas por el ciclo de Krebs.  

Por otro lado la fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, totalmente anaeróbico, siendo el producto final de un compuesto. Sirve como donador y aceptor de electrones y en el que el ATP se produce fosforilacion de un sustrato.

Ya que este es un proceso anaeróbico ya que se produce en ausencia de oxigeno esto significa que el aceptor final de electrones.

“El adenosin trifosfato (abreviado ATP, y también llamada adenosín-5'-trifosfato o trifosfato de adenosina) es una molécula utilizada por todos los organismos vivos para proporcionar energía en las reacciones químicas. También es el precursor de una serie de coenzimas esenciales como el NAD+ o la coenzima A. El ATP es uno de los cuatro monómeros utilizados en la síntesis de ARN celular. Además, es una coenzima de transferencia de grupos fosfato que se enlaza de manera no-covalente a las enzimas quinasas (co-sustrato).”(1)

“El ciclo de Krebs (conocido también como ciclo de los ácidos tricarboxílicos o ciclo del ácido cítrico) es un ciclo metabólico de importancia fundamental en todas las células que utilizan oxígeno durante el proceso de respiración celular. En estos organismos aeróbicos, el ciclo de Krebs es el anillo de conjunción de las rutas metabólicas responsables de la degradación y desasimilación de los carbohidratos, las grasas y las proteínas en anhídrido carbónico y agua, con la formación de energía química. El ciclo de Krebs es una ruta metabólica anfibólica, ya que participa tanto en procesos catabólicos como anabólicos. Este ciclo proporciona muchos precursores para la producción de algunos aminoácidos, como por ejemplo el cetoglutarato y el oxalacetato, así como otras moléculas fundamentales para la célula.” (2)

Metodología:

  Materiales:

Reactivos:

Procedimiento:

Parte A:

Se preparó la solución de levadura. Suspendiendo con agitación 5grs de levadura seca, más 200ml de agua destilada. Enfriar (un poco) antes de desarrollar el práctico.

Parte B:

1. Se llenó el vaso de precipitado con agua corriente
2. Se sostuvo, utilizando una pinza, la probeta (invertida) de 100ml de la forma que se indica en la figura.
3. Se introdujo un extremo de la manguera de goma hasta el fondo de la probeta y aspirar para desplazar el aire retenido. El otro extremo deberá adaptarlo al matraz kitassato cerrado con un tapón de goma. No es necesario desplazar la totalidad del aire, solo lo suficiente como para establecer un punto inicial de referencia, para así evitar el reingreso del aire estrangular la manguera con ayuda de una pinza.
4. Se tomó en enrase como Vol. Inicial a = 0
5. Se colocó en cada matraz 0,5gr del azúcar correspondiente y 10 ml de agua destilada
6. Posteriormente se agregaron 20 ml de suspensión de levadura a cada uno
7. Se tapó cada matraz con el tapón de goma, para evitar que los extremos de las mangueras toquen a superficie del líquido. Asegurar la presurización con cinta de enmascarar.
8. Se retiraron las pinzas para permitir la circulación de los gases.
9. Se agito frecuentemente cada uno de los matraces
10. Se marcó el punto de referencia inicial de cada probeta. Determinar el pH del agua corriente contenida en el vaso de precipitado, al empezar y terminar la experiencia.
11.  Se leyeron los volúmenes cada 10 minutos y completar la tabla 1 con los volúmenes leídos

Resultados:

1.-

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1.2.-

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1.3.-

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1.3.1.- (seccion 1)

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1.4.- (seccion 1)

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