MÉTODO. El procedimiento consistió básicamente de 3 etapas

MÉTODO

Para dar inicio con la práctica es importante  desinfectar el área de trabajo dentro del laboratorio para reducir los riesgos donde se presenta una alta carga microbacteriana.

El procedimiento consistió básicamente de 3 etapas:

En la primer etapa se colocó la muestra de jitomate en un recipiente de plástico y en otro recipiente del mismo material se colocó muestra de plátano,  para añadirles aproximadamente 250 ml de agua destilada, enseguida se procedio a romper las células del jitomate y plátano  para que se liberaran todos los orgánulos contenidos en el citoplasma a base de golpes con una batidora por un lapso de tiempo de 10 segundos, una vez triturada las muestras se procedió a colar para impedir el paso de trozos que no se molieron en el proceso.

Segunda etapa, preparación del tampón de lisis:

Se colocó ¼ de litro de agua destilada en un vaso de precipitado, para añadirle 1 cucharadita de sal de mesa, 2 cucharaditas de bicarbonato de sodio, y 2 cucharaditas de detergente salvo que este permitirá destruir las membranas celulares del tejido vivo tanto del jitomate como del plátano.

Enseguida en dos  matraz Erlenmeyer de 250 ml se vació 10 ml de jitomate (colado), con 20 ml del tampón de lisis, en el segundo matraz se le agregó 10 ml de plátano con 20 ml de tampón de lisis,  luego se taparon, agitaron aproximadamente por 2 minutos para dejar actuar adecuadamente el tampón de lisis, asumiendo que este disuelve las membranas biológicas haciendo que el ADN se libere del núcleo de la célula, cloroplastos y mitocondrias.

La disolución se filtra para pasar 3 ml de esta solución a un tubo de ensayo.

Tercera etapa, extracción de ADN:

El siguiente aspecto consistió en tomar los 3 ml de muestra de jitomate, 3ml de muestra de plátano  para añadir 3 ml de alcohol frío al 96°  por las paredes del tubo.

Cuarta etapa, recogida del ADN:

Con la ayuda de una pipeta Pasteur  o bien un asa bacteriológica ya esterilizada se  sacó el ADN de la muestra de jitomate y plátano contenidos en el tubo.

De modo que el ADN se colocó en un portaobjetos para así visualizarlo en un microscopio.

RESULTADOS

Como resultado tras cada uno de los pasos a seguir en la extracción de ADN se logró observar que en la muestra de plátano era más visible el ADN que en la de jitomate. Como se observa en la fig.  y fig.

El usar jabón lavavajillas nos permitió desintegrar la pared, membrana celular, y envoltura nuclear que se encargaban de cubrir las células vegetales en este caso las células del jitomate y plátano.

La sal de mesa se encargó de neutralizar la carga negativa de los grupos fosfatos en el ADN, el bicarbonato de sodio desarrollo la función de evitar que el pH se volviera muy bajo o elevara demasiado.

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