PRÁCTICA DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA GENERAL N° 2

PRÁCTICA DE LABOTARIO DE BIOQUIMICA GENERAL N° 2

PH Y SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Anderson Rom Rosero, Richard Pantoja Urbano

Fecha de realización de la práctica: 10/10/2022

Fecha de entrega de informe: 24/10/2022

OBJETIVO PERSONAL.

Determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos, sus propiedades reductoras y su estructura en las diferentes muestras problema.

RESULTADOS Y CÁLCULOS.

Tabla 1. Descripción cualitativa de cada reacción.

Muestra de Carbohidrato Tipo de Prueba (diferenciación cualitativa)

Molish Seliwaroff Bial Benedict Polisacáridos Barfoed

Almidón Negro Incoloro Verde No reacciona Azul No reacciona

Sacarosa Negro Rojo Verde 2 faces No reacciona No reacciona No reacciona

Glucosa Negro Incoloro Amarillo 2 faces Rojo No reacciona Pp Rojo

galactosa Morado incoloro Amarillo Rojo No reacciona Pp Rojo

Ribosa Negro Incoloro Amarillo Rojo No reacciona Pp Rojo

Fructuosa Morado Rojo Verde Rojo No reacciona Pp Rojo

Lactosa Negro Incoloro Amarillo Rojo No reacciona No reacciona

Jugo Morado Rojo

claro Amarillo Rojo No reacciona Pp Rojo

Harina Morado No reacciona Verde No reacciona azul No reacciona

Tabla 2. Cantidades de preparación de reacciones

CANTIDAD Molish

2 gotas Seliwaroff

1mL Bial

1mL Benedict

1mL Yoduro

2 gotas Barfoed

1mL

Carbohidrato 1mL 0.5mL 0.5mL 4 gotas 1mL 0.5mL

Añadido (mL) 0.5H2SO4 3 H2O

0.5 C₂H₆O - - - -

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Reacción de Molish

La prueba de Molish se utiliza para identificar carbohidratos en una muestra, la reacción se basa en la acción hidrolizante o deshidratante del ácido sulfúrico sobre los azucares. El ácido cataliza cualquier enlace glucósido presente en la solución, independientemente de que sean monosacáridos disacáridos o monosacáridos, para formar un compuesto furfurico, por la intervención del reactivo de Molish; este contiene α-naftol, que junto con el compuesto formado se obtiene visualmente una solución color morado y un precipitado de oxido producido por el cobre.

En la Tabla 1. Presentada anteriormente se puede notar que en la prueba de molish: para todas las soluciones usadas el resultado fue positivo, y el agua que era el blanco de la prueba no presento cambios, de esta manera podemos inferir que todas las muestras presentes eran carbohidratos incluyendo las muestras problema de jugo y harina; durante el desarrollo de la reacción de Molish se puede notar que algunos azucares reaccionan de forma más temprana, presentándose una coloración mucho antes que el resto, como el caso de la fructosa, la glucosa, o la ribosa, estos antes mencionados tienen en común que son monosacárido: moléculas de carbohidratos más sencillas, y son rápidamente hidrolizadas por el ácido. Por otra parte, algunos polisacáridos como la muestra problema de harina o el almidón tardan más en presentar coloración morada ya que sus enlaces glucídicos son más resistentes, a pesar de que el tiempo de reacción es diferente en todos los casos se puede evidenciar presencia de carbohidratos.

Figura 1. Reacción de Molish

Reacción de Seliwaroff

Al igual que la prueba de Molish es una prueba cualitativa coloreada, nos permite identificar grupos cetona, de esta manera se puede distinguir entre carbohidratos de tipo aldosa o cetosa. La reacción se lleva a cabo en medio acido, para ello se hace uso de HCL concentrado; las cetonas de deshidratan más rápido que los aldehídos produciendo antes un derivado furfural y este a su vez reacciona con resorcinol que esta presente en el reactivo de seliwaroff, si se aplica calentamiento la hidroximetilfurfural reacciona con el compuesto de seliwaroff produciendo el característico color rojo para cetosas; mientras que las aldosas quedas completamente incoloras; para el caso de soluciones como el almidón, la ribosa, lactosa y la muestra problema 2 con harina no presentaron

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