PRÁCTICA NO. 2 ESPECTROFOTOMETRÍA Y CURVA DE CALIBRACIÓN

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA NO. 2 ESPECTROFOTOMETRÍA Y CURVA DE CALIBRACIÓN

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ESTUDIANTES: PAULA SOFÍA LÓPEZ GAHONA

                                         LAURA ISABELA SALAMANCA MURCIA

DOCENTE: ARLEY CAMILO PATIÑO LLANO

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y ALIMENTARIAS

MEDELLÍN- ANTIOQUÍA

SEMESTRE 2022

Marco teórico 

Esta práctica de laboratorio se fundamenta en la espectrofotometría que es una técnica analítica  que determina la concentración de un compuesto tomando la intensidad de la luz absorbida por medio de una solución coloreada. [pic 2]

Dicha muestra lee La absorbancia que es la cantidad de luz absorbida con una longitud de onda específica, Se debe escoger una longitud de onda que sea la de mayor capacidad de absorción para contar con un valor óptimo en el espectrofotómetro y poder determinar la absorbancia de las soluciones.

Para utilizarlo primero se debe calibrar con un blanco para evitar interferencias en los datos y colocar las soluciones sucesivas en las celdas por orden de concentración.

Esta técnica se fundamenta en la ley de Lambert y Beer, establecen que la absorbancia es directamente proporcional a la concentración mediante la siguiente ecuación:  Donde E, es el coeficiente de extinción molar, B es la longitud de paso del haz de la luz por la muestra y C, es la concentración Recordando que E y B son constantes, y por otro lado la absorbancia no tiene unidades de medida porque todas las unidades se cancelan en el compuesto. Esta ley aplica si se conoce la absorbancia de una solución. [pic 3][pic 4]

Por otro lado, la curva de calibración es un método que determina la concentración de una sustancia en una muestra por medio de una señal, las señales más utilizadas son aquellas cuya relación con la concentración es lineal.

Datos

Resultados 

Fórmula para hallar la concentración: [pic 21][pic 22]

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Fórmula para hallar la pendiente: [pic 31][pic 32]

  En excel la pendiente toma más valores de las cifras significativas. [pic 33][pic 34]

Cálculo del punto de intersección: [pic 35][pic 36]

([pic 37][pic 38][pic 39]

Cálculo de la concentración de la muestra desconocida:[pic 40][pic 41]

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Análisis de los resultados  

Como se puede observar en los anteriores resultados mediante la ecuación  fue posible hallar la concentración de cada una de las soluciones, las cuales se encuentran organizadas en la primera tabla junto con su absorbancia, de igual manera por medio de la ecuación de la pendiente de la recta y el cálculo del punto de intersección se halla la concentración de la muestra problema, la cual equivale a .[pic 46][pic 47]

Por otro lado, podemos determinar que hay una relación proporcional entre la concentración y la absorbancia ya que podemos observar dicha relación de manera lineal, es decir, todos los puntos correspondientes a los datos pueden conectarse con una misma línea recta y porque su coeficiente correlacional es bastante cercano a 1. Dicho coeficiente es la medida específica que cuantifica la intensidad de la relación lineal entre dos variables en un análisis de correlación. Los valores de r positivos indican una correlación positiva, en la que los valores de ambas variables tienden a incrementarse juntos. (4)

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