PRÁCTICO N°6 Metabolismo de Carbohidratos.

PRÁCTICO N°6

Metabolismo de Carbohidratos.

OBJETIVOS

• Observar experimentalmente el proceso de metabolismo anaeróbico de fermentación.

• Comprobar el efecto de inhibidores de la glicólisis.

INTRODUCCIÓN

Todos los seres vivos requieren un continuo aporte de nutrientes para suplir sus necesidades de materia y energía. El principal nutriente de la célula es la glucosa, la que es catabolizada para producir ATP, la forma más importante de energía utilizable en la célula. El metabolismo aeróbico de la glucosa ocurre a través de una serie de reacciones:

Glicólisis:         [pic 1]

Descarboxilación oxidativa del piruvato: [pic 2]

Ciclo de Krebs:                 [pic 3]

Cadena respiratoria y fosforilación oxidativa: [pic 4]

En ausencia o deficiencia de oxígeno, ocurre el proceso anaeróbico de fermentación, en que el piruvato (producto de la glicólisis) se transforma en ácido láctico (músculo) o etanol (levaduras y bacterias).

Fermentación láctica:  [pic 5]

Fermentación alcohólica: [pic 6]

En presencia de suficiente oxígeno ocurre respiración celular aeróbica, en que el piruvato se incorpora a la mitocondria y se transforma en Acetil-CoA, el cual a través del ciclo de Krebs origina CO2 y coenzimas reducidas. Estas coenzimas reducidas se incorporan a la cadena respiratoria mitocondrial donde son reoxidados por O2, y que consecuentemente mediante fosforilación oxidativa producen ATP. Esta vía aeróbica es la principal vía de producción de ATP. En cambio, algunas células como los glóbulos rojos y las bacterias anaeróbicas estrictas tienen en el metabolismo anaeróbico la única vía de producción de ATP, en tanto que otras células como las levaduras, que son anaerobios facultativos, en ausencia de O2 realizan fermentación y en presencia de él, realizan respiración celular.

ACTIVIDADES

A. Fermentación alcohólica en levaduras (Saccharomyces cerevisiae).

La fermentación alcohólica en levaduras ocurre de acuerdo a la reacción:

[pic 7]

El etanol se acumula en el medio y el CO2 es liberado como gas, por lo que se puede medir la fermentación por la producción de CO2.

Procedimiento.

Soluciones y materiales:

• Solución de levadura 10%(p/v) a 43°C
• Solución de glucosa 10% (p/v) a 43°C
• Solución de NaF 0,1 M
• Solución rojo neutro 0,01 M
• Agua destilada a 43°C
• Papel pH y papel parafilm
• 4 tubos de ensayo
• Baño termorregulado a 43°C

1. Prepare la siguiente batería de tubos:

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