Periodo infectivo de hongos y bacterias PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE HONGO Y BACTERIAS.

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PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE HONGO Y BACTERIAS.

Mario Riaño, Juan Agudelo, Raúl Arias, Denilson Peña.

RESUMEN

El siguiente informe se realizó con el fin de determinar la patogenicidad que se da en bacterias y hongos, utilizando como procedimiento los postulados de koch, se trabajó con manzanas y plantas de tomate, para hongos y bacterias respectivamente, para el procedimiento con manzana se preparó agar de PDA, y se utilizaron los acervulos para hacer un cultivo puro de colletotrichum Sp luego se agregó agua destilada al cultivo, y con una jeringa se inoculó en las manzanas dejando una como testigo. En tomate se inoculó cepas de bacteria se Ralstonia solanacearum extraídas con un asa esterilizada por medio de fuego desde un agar de cetrimide, la prueba con manzana de patogenicidad resultó positiva ya que en la resiembra mostró los mismos resultados visto anteriormente en el PDA. En el tomate por medio de la prueba de flujo bacteriano tuvo un resultado negativo, y la prueba de peróxido de hidrógeno resultó positiva al presentar burbujas al tener contacto con el tallo.

Palabras clave: Patogenicidad, inoculo, flujo bacteriano, agar.

ABSTRACT

The following report was made in order to determine the pathogenicity that occurs in bacteria and fungi, using as a procedure the postulates of koch, we worked with apples and tomato plants, for fungi and bacteria respectively, for the procedure with apple was prepared PDA agar, and the acervulos were used to make a pure culture of colletotrichum Sp then distilled water was added to the culture, and with a syringe it was inoculated in the apples leaving one as a control. Tomato inoculated strains of bacteria of Ralstonia solanacearum extracted with a sterilized loop by means of fire from a cetrimide agar, the test with apple of pathogenicity was positive since in reseeding showed the same results seen previously in the PDA. In the tomato by means of the test of bacterial flow it had a negative result, and the test of hydrogen peroxide was positive when presenting bubbles when having contact with the stem.

Key words: Pathogenicity, inoculum, bacterial flow, agar.

INTRODUCCIÓN

Los hongos del género Colletotrichum constituyen un interesante campo de estudio, ya sea por algunas relaciones de patogenicidad que pueden establecer con humanos. (Liesegang and Forster 1980).

En Colombia los cultivos de manzano (Malus domestica Borkh.), son severamente afectados por la antracnosis afectada por el hongo colletotrichum y se reporta tradicionalmente a Colletotrichum gloeosporioides como causante de la enfermedad. Dicha enfermedad afecta tanto en pre -cosecha como en post-cosecha, y puede llegar a ocasionar pérdidas superiores al 50% en estos cultivos. (Osorio, 2003)

La diferenciación y el diagnóstico de las especies de Colletotrichum se ha basado en caracteres morfológicos, principalmente tamaño y forma de los conidios, presencia de setas, esclerocios, forma del apresorio, color y aspecto de la colonia, y otras características como tasa de crecimiento, sensibilidad a benomil, temperatura óptima de crecimiento, existencia del telemorfo y especificidad de hospedantes. (Martínez-Culebras et al., 2000)

La marchitez bacteriana causada por Ralstonia solanacearum, es una enfermedad que se encuentra distribuida a nivel mundial y afecta a cientos de especies de plantas en 54 familias. Las afectaciones provocadas por este patógeno no solo radican en el hecho de que destruye los cultivos, también posee una excepcional habilidad para sobrevivir en el agua, el suelo y la rizosfera de plantas no hospedantes. Esto, sumado a la frecuente presencia de infecciones latentes, estableció la necesidad de conocer y contar con métodos sensibles y específicos para detectar la bacteria en dicho estado.( Álvarez MB .,2009).

En la actualidad, existen una serie de pruebas descritas para el diagnóstico y la detección del patógeno (4). Sin embargo, el uso de estos métodos presenta ventajas y limitaciones en dependencia de las características de la técnica, la muestra problema o la prevalencia de la enfermedad; entre otros factores. ( Kelman A., 2007).

HONGO

PROCEDIMIENTO

Se utilizó un agar de PDA para realizar el cultivo de colletotrichum en caja Petri. Posteriormente se hizo resiembra del cultivo en 3 cajas Petri trasplantando los acervulos que se formaron en el centro de cada una de las cajas.

Cuando el hongo se desarrolló en los nuevos agares de PDA, se pasó a agregar 20 ml de agua destilada.

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Figura 1. Mezcla de agua destilada con el                                                                                                       agar que contiene el patógeno (Riaño, 2018)

Después de la mezcla se filtró en un beaker por medio de una gasa, teniendo así el patógeno en forma líquida.

INOCULACIÓN DE MANZANA:

se utilizaron 3 manzanas de las cuales se hizo un lavado para la esterilización.

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Figura 2. Compuestos químicos que se utilizaron para la esterilización. (Agudelo, 2018)

Luego de ser esterilizadas las manzanas se pasó a inocular el patógeno por medio de una jeringa, teniendo en cuenta los puntos cardinales del hospedante.

Se inoculo una manzana con agua destilada que fue utilizada como testigo, y las otras dos se inocularon con el patógeno.

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Figura 3. Inyección del patógeno al hospedante (Arias, 2018)

De allí se pasó a guardar en bolsas plásticas el hospedante, esperando así la reacción.

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