Práctica nº2: Micropipetas

Práctica nº2: Micropipetas

1) Objetivo:

Aprender la a usar correctamente las micropipetas o pipetas automáticas

2) Materiales

• Fungible:

• Papel de filtro (para proteger la mesa)
• Guantes
• Vasos de precipitados, tubos de ensayo…
• Puntas de micropipeta

• Inventariable:

• Micropipetas

3) Fundamentos:

• Vacío/presión negativa: La presión manométrica es la presión que ejerce un medio distinto al de la presión atmosférica. Representa la diferencia entre la presión real o absoluta (sumatorio de la presión manométrica y la atmosférica) y la presión atmosférica. Cuando esta cantidad es negativa se la conoce bajo el nombre de presión negativa.
• Capilaridad: Propiedad en virtud de la cual la superficie libre de un líquido puesto en contacto con un sólido sube o baja en las proximidades de este, según que el líquido lo moje o no; sus efectos son especialmente aparentes en el interior de los tubos capilares o entre dos láminas muy próximas. Depende de la tensión superficial del líquido, la cual a su vez depende de su cohesión.

4) Procedimientos:

        Lo primero que debemos hacer es seleccionar una micropipeta dentro de cuyo rango se encuentre el volumen que queremos y ajustarla al mismo. Después colocará una punta adecuada y se realizará un doble enjuague. Entonces se procederá a la técnica de pipeteo.

        Se presionará el émbolo hasta el primer tope y se introducirá la punta en el punto medio de la muestra. Se soltará el émbolo hasta su posición inicial y se sacará la punta del líquido asegurándose de que la punta toque la pared del recipiente para deshacerse de los excesos de líquido. Después soltaremos el líquido en el otro recipiente presionando el émbolo hasta el segundo tope. Sacaremos la punta del recipiente y la desecharemos.

La descrita se denomina “técnica directa de pipeteo”. Existe una “técnica inversa” utilizada para soluciones de gran viscosidad en la que primero se presiona hasta el segundo tope y luego sólo hasta el primero, pero carece de interés ya que no realizamos ninguna práctica con un líquido de este tipo.

5) Ejercicios:

La segunda vez que subimos al laboratorio combinamos el uso de pipetas normales con micropipetas. Partiendo de unas alícuotas de agua de 3 y 2ml realizadas con las pipetas convencionales, procedimos a realizar un proceso similar con las micropipetas. Utilizando una de 1000μl realizamos dos trasvases, uno de 500μl y otro de 100μl a partir de la alícuota de 3ml, y con una de 500μl realizamos otros dos trasvases de 50μl y 20μl a partir de la alícuota de 2ml. Tras esto hicimos las restas para calcular qué volumen de agua quedaba en cada vaso de precipitados, lo cual nos da 2,4ml en el primer vaso y 1.93ml en el segundo.

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