Proyecto (penicilina)

RESULTADOS

Obtención de la muestra

Para la obtención del hongo de Penicillium chrysogenum se tomó como muestra una naranja que presentaba características de una naranja con dicho hongo este  también puede ser extraído de pan sin embargo en algunas bibliografías consultadas hacen hincapié en el hecho de que el hongo tiene mayor producción del metabolito en cuestión si este es extraído de una naranja debido a que es un microorganismo nativo del suelo y es un gran problema en los alimentos.

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1. Preparación de la muestra

Una vez realizado el raspado de la muestra de naranja se prepararon tubos con agua destilada para hacer una disolución de las esporas y posteriormente sembrar en medio Agar Sabouraud además de sembrar por el método de estría.

Las placas se dejaron durante 7 días a 25 °C para posteriormente realizar la identificación de este.

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1. Aislamiento del microorganismo de interés

Se tomó la muestra de la sepa (fig.3) a la cual previamente se le realizo pruebas bioquímicas para la identificación del hongo Penicillium (fig.4)

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Para el aislamiento del microrganismo de interés se realizó un medio de maíz macerado para el cual se ocupó maíz tierno, sacarosa y agar-agar con una relación 20 /20 realizando el sembrado con ayuda de un horadador dejando crecer el hongo por 7 días a  25 ° C

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1. Pruebas bioquímicas para la identificación del microorganismo de interés

Durante el proceso de la obtención de nuestro metabolito secundario (penicilina) se realizó pruebas al hogo con tinción de azul de algodón para la identificación. Tomando una muestra de la cepa aislada (Fig.5).

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Se realizó una comparación de la fig.6 la cual se observó en el microscopio con azul de algodón y la fig.7 imagen consultada en bibliografía.

1. Conservación de la cepa

La conservación  se realizó por el método de conservación en tierra estéril que se colocó dentro de frascos ámbar posteriormente se dejó por 7 días en incubación y se realizó medio Sabouraud para realizar el sembrado de la conservación y comprobar la viabilidad de la cepa obteniendo resultados favorables

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1. Obtención del metabolito de interés

Después de la conservación se tomó una azada de la cepa (fig.8) y se preparó medio agar Sabouraud para sembrar en este con el fin de tener cepa para demostrar la presencia del metabolito y la obtención del mismo, la manera que opto para demostrar que el metabolito de interés se encontraba presente fue el sembrar una bacteria para observar la inhibición del mismo  

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1. Cuantificación del metabolito de interés

Durante el crecimiento del hongo se observó que este crecía aproximadamente medio centímetro por día a una temperatura de 25 ° C en el medio de maíz tierno,

Se observó que el hongo de penicilina crecía sobre la bacteria que se usó para inocular en este caso E.coli debido a que el hongo solo inhibe el crecimiento de bacterias Gram-positiva y la bacteria en cuestión fue una Gram-negativa  por lo tanto se observó (fig.10 )  que solo se tenía un crecimiento en la superficie

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DISCUSION DE RESULTADOS

Durante el siglo XX la llamada “Edad de Oro” de los antibióticos comienza en 1941 con la producción a gran escala de la penicilina y su empleo en la práctica clínica. En el trabajo realizado, como objetivo principal es comprobar la presencia de nuestro metabolito de interés en este caso penicilina a partir del hongo penicillium chrysogenum encontrado principalmente en frutos cítricos, tomando muestra del hongo de la superficie de una naranja caracterizado por el color verde azulado que presenta dicho hongo, en “la producción y extracción de penicilina” realizada por la estudiante Luz Torres tomando muestras de diferentes alimentos como el pan, queso y naranja, determino que en la naranja se observó una mayor producción de penicilina en comparación a los demás alimentos, ya que en los cítricos hay una mayor concentración de humedad permitiendo que el hongo crezca con mayor facilidad en zonas abiertas de los frutos.  

El hongo Penicllium chrysogenum es encontrado en estos frutos de una forma seca y esporulada (como polvo), por lo tanto la resuspención con agua destilada estéril se realiza principalmente para tener una mayor homogeneidad de esta y el sembrado en placa pueda hacerse de la manera deseada, como una forma de toma de muestra obtenido de ferraris 2000. Así mismo en el aislamiento de nuestro microorganismo productor de penicilina se ha descrito que el medio agar sabouraud es un medio favorable para el crecimiento de los hongos siendo ligeramente inhibitorio para las bacterias, teniendo así un medio de cultivo selectivo. Pudiendo hacer las pruebas bioquímicas con azul de algodón ya que este método es utilizado principalmente para la observación microscópica de los hongos filamentosos, con muestras principalmente de la naranja putrefacta. Cada uno de los constituyentes del colorantes lactofenol azul de algodón cumple una función determinada:

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