Prueba De Meloxicam

Prueba confirmatoria para la determinación de meloxicam en el plasma humano por

cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)

Principios de la tecnica

 En la cromatografía líquida, la fase móvil es un líquido que fluye a través de una columna que

contiene a la fase fija. La separación cromatográfica en HPLC es el resultado de las

interacciones específicas entre las moléculas de la muestra en ambas fases, móvil y

estacionaria

A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidos de alto rendimiento

(HPLC, de high‐performance liquid chromatography) no está limitada por la volatilidad o la

estabilidad térmica de la muestra.

La HPLC es capaz de separar macromoléculas y especies iónicas, productos naturales lábiles,

materiales poliméricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de alto peso

molecular. Con una fase móvil líquida interactiva, otro parámetro se encuentra disponible para

la selectividad, en adición a una fase estacionaria activa.

La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor gama de

estas interacciones selectivas y más posibilidades para la separación.

HPLC preparativa

Es la técnica escogida para aislamiento y purificación de productos de valor en las industrias

químicas y farmacéuticas así como en la biotecnología y la bioquímica. La cromatografía

preparativa comprende un amplio rango de aplicaciones, desde el aislamiento de 1µg de

muestra para identificación espectroscópica hasta el aislamiento de un compuesto puro de una

mezcla de 100 g.

 Campo de Aplicación de HPLC

Fármacos: Antibióticos, sedantes esteroides, analgésicos

Determinación de meloxicam en plasma humano por HPLC

 En la prueba confirmatoria de toxicidad para el meloxicam (inhibidor COX‐2) en la orina por

cromatografía líquida de alta resolución Piroxicam se utilizó como estándar interno. Fue

utilizado con cromatografía de fase inversa en columna S ynergi modelo MAX‐RP (150 x 4,6

mm), a una temperatura de 30 ° C y una fase móvil que consiste en acetonitrilo y tampón de

fosfato de mezcla de 0,025 mol /L pH 4,5 (40: 60, v /v) a una velocidad de flujo de 1,0 ml /

min. Los analitos se detectaron mediante UV a 364 nm. Las muestras de plasma se acidificaron

con ácido clorhídrico 1 mol /L, se extrajeron utilizando éter terc butil metil y después de la

filtración y el secado, el residuo se reconstituyó en 250 ml de fase móvil y se inyectó en

HPLC. El tiempo de retención de meloxicam (estándar) y piroxicam (estándar interno) fueron

3,35 y 4,19 minutos, respectivamente. Este método fue lineal en el intervalo de concentración

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