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Pruebas bioquímicas klebsiella


Enviado por   •  22 de Mayo de 2017  •  Trabajo  •  1.225 Palabras (5 Páginas)  •  678 Visitas

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INTRODUCCIÓN

Cuando se habla de Bacterias, es necesario resaltar gran parte de lo que las conforman, sus componentes, su procedencia, degradación y producción entre otros aspectos que se pueden analizar y evidenciar por medio de prácticas tales como las pruebas de diferenciación Bioquímicas.

Las pruebas de diferenciación Bioquímicas se fundamentan en analizar y diferenciar las bacterias, identificar sus capacidades de fermentación en distintas sustancias y productos, especificar su composición y componentes que la conforman, y sus características metabólicas en general.

Cuando se realiza un respectivo análisis de pruebas, lo principal siempre es basarse en la observación, así como identificar reacciones que enriquecen nuestro trabajo, cambios que denoten un avance en el mismo y una oportunidad de analizar nuevos resultados, resaltando entonces, la viabilidad de la utilización de las pruebas de diferenciación bioquímicas para observar de primera mano distintos aspectos de la bacteria, tales como condiciones de oxigeno por parte de las mismas, y en primera instancia su caracterización bioquímica.

MATERIALES Y METODOS

1 gradilla            

1 asa de siembra  

1 cultivo puro bacteriano

Kit o batería de pruebas bioquímicas para Gram negativos que se harán en la práctica:

1. LIA (Agar lisina hierro)

2. RM‐VP (rojo metilo‐ Voges proskauer)

3. SIM (Sulfuro, Indol, Movilidad)  

4. Medio TSI (triple azúcar hierro)  

5. Medio de citrato de Simmons  

6. Caldo urea  

7. Agar fenil alanina desaminasa

8. Caldo triptófa

PROCEDIMIENTO:

Se trabajará con un cultivo puro ya sea de Bacillus subtilis, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens y Klebsiella sp, que luego inocularemos en diferentes medios de cultivo para luego determinar las diferentes actividades metabólicas.

Algunos pasos son:

1. Inocular cada cepa en una serie de tubos  

2. Incubar los tubos a 35°C durante 24 a 48 horas.

3. Hacer observaciones a las 24 y 48 horas de incubación. Determinar si hay crecimiento, cambios en el color del indicador, producción de gas, etc.

RESULTADOS

Pruebas bioquímicas LIA: Lisina hierro agar

Color inicial

Color final

Resultado

Descripción

Descarboxiliación de lisina

Negro oscuro

Amarillo, rojizo

[pic 1]

Es negativo cuando el medio en el fondo se puede ver tonos amarillentos.

Dasaminisación de lisina

Negro oscuro

Amarillo,

Rojizo

En la prueba no se logró observar ninguna coloración púrpura que identificara su origen negativo o positivo.

Producción de H2S (acido sulfurhidrico)

Negro          osuro

Amarillo,

Rojizo

[pic 2]

La prueba es negativa si hay ennegrecimiento del medio.

[pic 3]

[pic 4]

Pruebas bioquímicas: Medio Citrato Simons

Color inicial

Color final

Resultados

Descripción

Cambio de color

Verde pálido

Verde pálido

[pic 5]

El medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.

Utilización del citrato 

Verde pálido

Verde pálido

[pic 6]

No cambio su coloración.

[pic 7]

Pruebas bioquímicas: SIM

Color inicial

Color final

Resultado

Descripción

Producción de H2S (ácido sulfurhídrico)

Amarillo blancuzco

Negro

[pic 8][pic 9]

Ennegrecimiento a lo largo de la línea de siembra o en todo el medio. 

Producción de indol

Amarillo blancuzco

Negro

[pic 10]

Sin cambio de color.

Movilidad

Amarillo blancuzco

 

Negro

[pic 11]

Cepas inmoviles, el crecimiento se observa solamente en la línea de siembra.

Crecimiento superficial en la parte media, fondo

Amarillo blancuzco

Negro

[pic 12][pic 13]

Crecimiento superficial en todo el medio.

Pruebas bioquímicas: Caldo urea

Color inicial

Color final

Resultados

Descripción

Crecimiento

Amarillo pálido

Rosado

[pic 14][pic 15]

Cambio de color, hubo crecimiento.

Sin cambio(rosa)

Amarillo pálido

Rosado, rojizo

[pic 16][pic 17]

Indicador rojo de metilo, cambio de color, presencia de microorganismos.

Hidrolisis de urea

Amarillo pálido

Rosado

[pic 18][pic 19]

Presencia de microorganismos.

[pic 20]

Pruebas bioquímicas: TSI

Color inicial

Color final

Resultados

Descripción

Crecimiento

Rojo

 intenso

Amarillo, con negro en medio

[pic 21][pic 22]

Cambio de color, crecimiento de microorganismos.

Producción de gas

Rojo intenso

Amarillo, con negro en medio

[pic 23][pic 24]

Cuando hay producción de gas, se da el rompimiento en el medio.

Producción de H2S

Rojo intenso

Amarillo, con negro en medio

[pic 25][pic 26]

Cambio de color, con presencia de H2S.

Fermentación de glucosa

Rojo intenso

Amarillo, con negro en medio

[pic 27][pic 28]

Formación de productos alcalinos, a partir de la utilización de la peptona sobre la zona inclinada.

Sin fermentación de azúcar

Rojo intenso

Amarillo, con negro en medio

[pic 29][pic 30]

Fermentación de glucosa y productos alcalinos.

[pic 31]

...

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