¿Qué significa in vitro? (del latín in: adentro, vitro: vidrio).Forma de indicar que las plantas o partes de las plantas estudiadas fueron cultivadas dentro de un contenedor de vidrio.

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Índice

Introducción………………………………………………………………………………3

Desarrollo………………………………………………………………………………….4

1. Materiales…………………………………………………………………………..4
2. Procedimiento……………………………………………………………………...5

Diagrama de flujo………………………………………………………………………...7

Conclusión………………………………………………………………………………..8

Bibliografía………………………………………………………………………………..9

Introducción

¿Qué significa in vitro? (del latín in: adentro, vitro: vidrio).Forma de indicar que las plantas o partes de las plantas estudiadas fueron cultivadas dentro de un contenedor de vidrio.

Se ha definido al cultivo de tejidos vegetales como una herramienta de la biotecnología vegetal que aísla partes de una planta y las hace crecer en un medio de cultivo artificial in vitro en condiciones de asepsia para obtener metabolitos, tejidos, órganos o plantas completas.

En un laboratorio de cultivo de tejido vegetal in vitro se necesita contar con ciertas aéreas, materiales, equipo e instalaciones los cuales se presentan a continuación en el desarrollo de este reporte que tiene como objetivo proporcionar la información necesaria para llevar a cabo la técnica de cultivo de tejido vegetal in vitro.

Materiales

• Frascos de vidrio (en este caso se utilizaron frascos para análisis clínicos, ya que estos vienen previamente esterilizados y no contábamos con autoclave para esterilizar el material)
• Balanza analítica.
• Auto clave.
• Vasos de precipitado.
• Pinzas.
• Mechero.
• Bisturí.
• Agua destilada.
• Alcohol.
• Cloro.
• Tejido vegetal deseado.
• Medio de cultivo MS (nosotros no contábamos con este recurso e hicimos una adecuación que fue una mezcla de agar nutritivo y sacarosa)

NOTA: contar con guantes de látex, cubre bocas y bata de laboratorio.

Procedimiento

1. preparar el medio de cultivo MS:

• Colocar en un agitador magnético una jarra de 1L de capacidad con uno 400ml de agua destilada y añadir los elementos minerales y las vitaminas (100ml del stock de macronutrientes, 100ml del stock de Ca, 1ml del stock de micronutrientes, 10ml de la solución hierro EDTA, 10ml del stock de vitaminas, adicionar la cantidad estimada de las soluciones de fitohormonas, 30gr de sacarosa) y esperar a que se disuelva.
• Añadir agua destilada hasta un volumen de 1L.
• Colocar la mezcla en una jarra y ajustar, en un pHmetro, el pH del medio hasta 5.8.
• Añadir 7,5g de agar y disolverlo en el autoclave.
• Agitar el medio, dosificarlo en los recipientes del cultivo, y colocar las tapas.
• Esterilizar el medio en el autoclave durante 20min a 120oC y 1 kg/cm2 de presión. Dejar enfriar el medio antes de su utilización.

Adecuación: no contábamos con el medio MS y en su lugar utilizamos 11.5g de agar nutritivo y 3.5g de sacarosa (fuente de carbono) en 500ml de agua, mezcla que calentamos hasta que se torno transparente para posteriormente dosificarlo en los recipientes del cultivo flameando la boca del recipiente y cerrando rápidamente ya que no contábamos con el autoclave necesario para la esterilización siguiente.

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