Reporte de prácticas de laboratorio

DATOS GENERALES

Unidad de Aprendizaje

Fase 2. Separar mezclas de compuestos orgánicos

Semestre

Segundo

Grupo

08

DATOS DE LA PRÁCTICA

No. Práctica

10

No. Equipo

9

Fecha

28/04/2023

Nombre de Práctica

Cromatografía

Objetivo

Comprender el fundamento de la separación por la técnica de cromatografía en capa fina, para su empleo como método de separación e identificación.

Fundamento

La cromatografía líquida (HPLC), es una técnica utilizada para separar, identificar y determinar los componentes químicos de una mezcla. Ningún otro método de separación es tan potente y de aplicación tan general. Consiste en una fase estacionaria no polar (columna) y una fase móvil. La fase estacionaria es sílica que se ha tratado con RMe2SiCl, donde la R es una cadena de alcano tal como C18H37 o C8H17. La fase móvil actúa de portador de la muestra. La muestra en solución es inyectada en la fase móvil. Los componentes de la solución emigran de acuerdo con las interacciones no-covalentes de los compuestos con la columna. Estas interacciones químicas, determinan la separación de los contenidos en la muestra. La utilización de los diferentes detectores dependerá de la naturaleza de los compuestos a determinar.

En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa) depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una lámina de aluminio o de plástico.

Esta técnica está indicada para aplicarse en la separación de compuestos orgánicos semivólatiles.

Hidrocarburos Poliaromáticos (PAHs), Aminoácidos: OTA, Ácido Fólico, Herbicidas, Vitaminas, Acido tenuazonico, Formaldehído, etc.

Rango de trabajo para muestras líquidas: µg L-1 - mg L-1

Rango de trabajo para muestras sólidas: µg Kg-1 - µg g-1

Alumno

Beu Ribé Lugo Guerrero

Equipo utilizado

• Cuba cromatográfica
• Tubos capilares
• Papel cromatográfico
• Pinzas
• Guantes
• Lápiz
• Regla

Reactivos:

Butanol

Ácido acético glacial

Agua

Colorantes vegetales

Ninhidrina al 1%

Aminoácidos

RESULTADOS

Colorantes:

[pic 19]

[pic 20]

[pic 21]

No hubo cálculos en aminoácidos porque no hubo resultado favorable.

Discusión de resultados

Obtuvimos solo 3 marcas en la cromatografía de colorantes, creemos que fue debido a que el punto fue pequeño y solo agregamos 2.6ml de butanol-ácido acético-agua (12:3:5). En la prueba de aminoácidos, no nos salió como esperabamos, tuvimos muchas complicaciones al momento de hacerla, debido a que la marca de la muestra se fue hasta arriba, es decir, del 1cm que estaba marcado en la parte inferior del papel se fue hasta la parte superior, al 0.5cm, no hubo separación de colores y no hubo marca central.

Conclusiones

Aprendimos a realizar la cromatografía, así como el uso de la cuba cromatográfica, también logramos realizar la cromatografía de los colorantes, sin embargo, no se logro realizar con éxito la de los aminoácidos. Comprendimos que la cromatografía es una técnica para separar mezclas de dos o más compuestos orgánicos.

Cuestionario

1. Mencione tres adsorbentes diferentes mencionados en esta práctica.

• Óxido de aluminio
• Poliamidas
• Celulosa
• Gel silicio 

1. Escriba 5 agentes cromogénicos (diferentes a la luz UV) utilizados en la cromatografía en capa fina.

• Óxidos férricos
• Cloruro de cobalto 2%

• Ácidos fúlvicos
• Vapores de yodo
• Ácido fosfomolibdico

1. ¿Por qué debe cuidarse al colocar la placa o el papel para cromatografía, los puntos de aplicación de las muestras queden por encima del nivel del eluente?

Para evitar que se disuelva y no haya resultado de la fase móvil en la estacionaria, ya que no debe ir a la misma velocidad.

1. ¿Les parecería un buen cromatograma aquel en donde la muestra aplicada corrió junto con el frente del eluente?

Sí, ya que puede absorber y así conocer todos sus componentes.

Bibliografía

Barcelona, U. d. (s.f.). 12.2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA Y EN COLUMNA. Obtenido de Operaciones básicas en el laboratorio de química: https://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_tipus.html

Cárdenas, D. L., González González, D., Hernández Ramírez, D., & Torres Martínez, M. (2023). Manual de Laboratorio de Química Orgánica Básica. San Nicólas de los Garza: FCQ. UANL.

Miranda, A. (s.f.). Cromatografía Líquida (HPLC). Obtenido de https://www.ucm.es/data/cont/docs/650-2013-12-02-gases%20l%C3%ADquidos.pdf