Reticulocitos

RETICULOCITOS

Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros o jóvenes que contienes restos de ARN, ribosomas principalmente que en contacto directo con ciertos colorantes, mal llamados vitales, precipita baja forma de filamentos o gránulos visibles mediante el microscópico óptico. Su tamaño que varía de 10 - 15 micras de diámetro. En condiciones normales los reticulocitos permanecen en la medula ósea durante 2 a 3 días y terminen su maduración en la sangre periférica después de unas 24 horas de abandonarla. Pese a ello los reticulocitos circulantes presentan un grado variable de madurez, de forma que mientras que los más jóvenes poseen abundantes filamentos los más maduros suelen presentar escasos precipitados granulares que pueden pasar inadvertidos

MÈTODO DE RECUENTO

El recuento de reticulocitos debe llevarse a cabo a partir de la sangre total con anticoagulantes EDTA-K3 Y DENTRO DE LAS 24 horas de haberse practicado la extracción si la muestra se conserva a temperatura ambiente o dentro de las 48 horas si se hace a 48 grados centígrados (nevera). Para el recuento de reticulocitos pueden emplearse dos métodos: manual mediante microscopio óptico y automático mediante cartometría de flujo.

Recuento manual de reticulocitos

Consiste en contar los reticulocitos mediante el microscopio óptico convencional después de incubar la sangre en presencia de un colorante vital que se fija al ARN y da lugar a precipitados de color violeta oscuro que tienden a formar estructuras de aspecto filamentoso o reticulado. Este procedimiento de recuento constituye el método de referencia internacional para el recuento de reticulocitos recomendado por la ICSH y la OMS.

Muestra: Sangre capilar o venosa con anticoagulante EDTA-K2 (1,5 mg/ml).

Material

Microscopio

Balanzas

Pipetas de pasteur

Portaobjetos de 25 x 75 mm.

Tubos de ensayo pequeño

Ocular especial que lleva un doble recuadro (disco de Miller).

El ocular de Miller lleva grabado un doble recuadro que está constituido por dos campos cuadrangulares (concéntricos) el área del mayor es 10 veces la del pequeño. Si no se tiene este ocular puede colocar en el ocular del microscopio una pieza de papel negro y rígido en la que se haya abierto un orificio de unos 5 mm de diámetro.

Solución colorante

Se puede utilizar cualquiera de los siguientes aunque el mètodo de referencia (ICSH) recomienda el azul de metileno nuevo (AMN):

Azul de metileno nuevo (AMN):

AM…………………………. 0,5 g

Oxalato de potasio…………..1,6 g

Agua hasta ……………….....100 ml

Azul de cresilo brillante (ACB):

ACB…………………………1 g

Citrato trisódico……………...0,4 g

Solución de cloruro sódico al 85% …..100ml

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