TIPIFICACIÓN SISTEMA ABO EN TUBO

2.- TIPIFICACIÓN SISTEMA ABO EN TUBO

2.1.- PRUEBA DIRECTA (CELULAR)

2.1.1.- OBJETIVO

Describe el procedimiento estandarizado para determinar la presencia o ausencia  de antígenos en la superficie de los eritrocitos, utilizando anticuerpos anti-A y anti-B, mediante la técnica de hemoaglutinación en tubo.

2.2.- ALCANCE

Esta prueba de identificación del grupo sanguíneo del sistema ABO, se realiza a todas las muestras de sangre que llegan al STHMI LP, de pacientes internados y ambulatorios. Además la prueba de tipificación, se realiza a todas las unidades de sangre (PG y ST) cumpliendo el protocolo de las pruebas cruzadas de compatibilidad antes de su administración.

2.3.- FUNDAMENTO DEL MÉTODO

Se basa en una reacción inmunológica de aglutinación antígeno-anticuerpo, cuando se produce el contacto de los antígenos presentes en la membrana de los hematíes, con el antisuero respectivo.

2.4.- MÉTODO  

Operaciones  preliminares

1. Antes de iniciar los procedimientos de las pruebas pretransfusionales, el personal debe vestir la ropa de protección individual (EPI) y cumplir con las normas de Bioseguridad.
2. Preparar el área de trabajo con el equipo, material y reactivos necesarios (atemperados a medio ambiente)
3. Registrar las solicitudes de exámenes por orden de llegada o según la urgencia.

Glóbulos rojos lavados con solución Fisiológica 0.9%

1. Centrifugar el tubo de la muestra de sangre de 3 a 5 minutos a 3.500 rpm, separar el suero o plasma de los eritrocitos.
2. Llevar 200 ul. de eritrocitos a un tubo de hemólisis y  completar con solución Salina hasta ¾ partes del tubo y mezclar delicadamente.
3. Centrifugar a 3.500 rpm durante 3 minutos y desechar la solución sobrenadante, este procedimiento se realiza tres veces o hasta que la muestra este clara.
4. Los glóbulos rojos lavados, suspender en solución fisiológica, hasta lograr una dilución de 2% o un color a jugo de tomate.

2.4.1.- PROCEDIMIENTO

1.  Identificar 3 tubos de hemolisis, con A, B y AB y las iníciales del paciente.
2. Colocar 1 gota del reactivo y/o hemoclasificadores anti-A, anti-B y anti-AB,  en los tubos de hemolisis respectivamente identificados.
3. Agregar 1 gota de los eritrocitos de la suspensión al 2% a cada tubo, de la muestra en estudio.
4. Mezclar el contenido de los tubos delicadamente, luego centrifugar a 3.500 rpm, durante 15 a 30 segundos, para observar mejor la reacción antígeno – anticuerpo (formación del botón celular).
5. Desprender con movimientos suaves, el botón de las células y observar la presencia de aglutinación a simple vista en presencia del fluroscopio.
6. Leer, interpretar y registrar los resultados de la prueba. Comprobar los resultados de la prueba, con los obtenidos en el suero o plasma (prueba inversa).

2.5.- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

2.6.- CONTROLES

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