Tesis Diseño Y Generación De Plasmidos De Expresión

El CaCU es una infección causada por el virus del papiloma humano (VPH) oncogénico que causa neoplasias malignas en mujeres. El descubrimiento de nuevos sistemas de regulación génica como los RNA pequeños ha tenido un impacto significativo en la biología molecular, aportando las bases para la aplicación de los miRNAs en el diagnóstico y pronóstico de enfermedades, así como en el desarrollo de nuevas opciones terapéuticas más selectivas y con menores o nulos efectos adversos. Los miRNAs son pequeños fragmentos de ácidos nucleicos formados en cadena sencilla, tienen un tamaño aproximado de entre 19-25nt y son RNAs endógenos no codificantes. Generalmente son biomoléculas reguladoras, por lo que alteraciones en los patrones de expresión de éstas pueden contribuir al desarrollo de diversas enfermedades como el cáncer, y la ocurrencia y progresión de este pueden estar asociadas con la desregulación de uno o más miRNAs. Gran número de miRNA han sido identificados en el genoma de humano, entre los cuales se encuentra el miRNA humano miR-184, que se ha encontrado sobre expresado en distintos tipos de cáncer.

Un enfoque alternativo que ha atraído considerable interés es la generación del pre-miRNA (tallo-asa) mediante la transfección de un plásmido que codifica al pre-miRNA impulsado por un promotor de RNA polimerasa III (U6, H1, 7SK) o promotor de RNA polimerasa II (CMV o SP-C). Por lo tanto el objetivo del presente trabajo fue generar plásmidos de expresión de siRNAs específicos para el miRNA humano miR-184 con potencial de silenciar la expresión de este microRNA.

...