Tincion De Wrintch

TINCION DE WRIGHT

Los colorantes de anilina, ampliamente usados en los estudios de la sangre, son de dos tipos en general: los básicos, como el azul de metileno, y los ácidos como la eosina. Los núcleos y algunas otras estructuras de la sangre se tiñen con los colorantes básicos, por lo que se denominan basófilos, ciertas estructuras sólo toman los colorantes ácidos y se llaman acidófilas o eosinófilas. Otras estructuras se tiñen con una combinación de ambos y se denominan neutrófilas.

La tinción de Wright se trata de una solución de eosina y una mezcla compleja de tiacinas, que incluyen el azul de metileno normalmente del 50 al 75%, azur B (10 a 25%) y otros derivados. Este colorante es expendido por el comercio. En ésta tinción se utiliza también una solución buffer o tampón (pH 6.4) que contiene fosfato diácido de potasio (KH2PO4), fosfato monoácido de sodio (Na2HPO4) y agua destilada.

La naturaleza acida o básica de las estructuras celulares determina su avidez por los componentes del colorante poli cromático de Wight; es así como los ácidos nucleicos se tiñen con azul de metileno que es básico (azul-morado) y la hemoglobina con la eosina que es acida (rosada).

Se controla con extendidos de sangre en donde cada una de las diferentes células sanguíneas tiñen de acuerdo a su composición así:

Glóbulos rojos: rojo amarillento.

Neutrofilos: cromatina púrpura oscuro; citoplasma rosa pálido; gránulos lila.

Eosinofilos: cromatina púrpura oscuro; citoplasma azul pálido; gránulos rojo brillante.

Basofilos: cromatina púrpura oscuro; gránulos azul oscuro.

Linfocitos: cromatina púrpura oscuro; citoplasma azul cielo.

Monocitos: cromatina púrpura medio; citoplasma azul grisáceo; gránulos lila.

Plaquetas: granulomero de violeta a púrpura; hialomero azul claro.

Procedimiento: Las extensiones de sangre se deben teñir pocas horas tras la preparación; si tienen que mantenerse sin teñir, habrán de ser fijadas. La fijación y la tinción se pueden hacer por inmersión de las preparaciones en recipientes llenos de reactivo o cubriéndolas con los reactivos en posición horizontal. En este último se cubre la extensión con abundante colorante, se evitará la evaporación, la cual da lugar a precipitación.

1.- La fijación se realiza durante 1 a 2 minutos con metanol absoluto. La preparación se expone a continuación a una solución no diluída de tinción durante 4 min. Luego, sin quitar la tinción de la preparación horizontal se añade con cuidado una cantidad igual de buffer y se mezcla soplando suavemente con una pipeta. Esta mezcla se deja por 10 min.

2.- Se limpia con abundante agua el colorante de la preparación horizontal. El lavado durante más de 30 seg reduce la coloración azul. La parte posterior de la preparación se limpia con una gasa.

3.- Se deja

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