UTILIZACIÓN DE CARBOHIDRATOS Y ÁCIDOS ORGÁNICOS

PRÁCTICA 1

“UTILIZACIÓN DE CARBOHIDRATOS Y ÁCIDOS ORGÁNICOS”

Habilidades

Identifica la actividad enzimática de los microorganismos sobre los carbohidratos y los ácidos orgánicos utilizando diversos medios de cultivo

Resultados

Prueba K. pneumoniae Salmonella typhi Bacillus subtilis Pseudomonas aureginosa

Almidón Negativo Positivo Negativo

DURHAM

Glucosa Ácido

Lactosa Gas

Maltosa Ácido

Sacarosa Negativo

KLIGER: K/A

Glucosa K

Lactosa A

Gas Negativo

H2S Positivo

Rojo de Metilo Negativo

Voges Proskauer Positivo

Citrato Positivo

Malonato Positivo

Discusión

Las bacterias pueden usar alimentos macromoleculares; para ellos es necesaria una hidrolisis extracelular preliminar, para este fin las bacterias utilizan una cierta variedad de enzimas extracelulares que segregan al medio. Bacillus subtilis es una bacteria que utiliza la amilasa para este fin, y es por ello al momento de agregar el lugol a las colonias de Bacillus subtilis estas formaron un halo transparente, como amarillosos, que indica positivo en la prueba de digestión de polisacáridos, caso contrario a las bacterias Pseudomonas aureginosa, Salmonella typhi donde no se utilizan este tipo de enzima para la degradación de almidón y donde no se formo ningún halo.

De igual manera las bacterias pueden o no utilizar un tipo de carbohidrato en especifico, esto se determino en la prueba de fermentaciones carbohidratos en tubos de Durham donde se observo que la bacteria Salmonella typhi utiliza a la glucosa y maltosa, esto se aprecio por la producción de ácidos a partir de la fermentación de dicho carbohidrato que es expresado con una coloración amarilla en el tubo, ya que si se expresa una coloración roja, como el caso de la lactosa y sacarosa, significa que la bacteria utilizo las peptonas y por lo tanto produjo sustancias alcalinas. Sin embargo en la lactosa a pesar de ser negativa hubo una producción de gas.

Otra prueba que indica la utilización de un tipo se carbohidrato es la de fermentación de carbohidratos en un medio gelificado (prueba de Kligler), donde se comprobó que efectivamente Salmonella typhi utiliza la glucosas como carbohidrato y pero no utiliza la lactosa, ya que se formo un color rojo en el pico de flauta, reacción alcalina, y color rojo en la capa profunda, reacción ácida, lo cual indica que solo fermenta la glucosa.

En la prueba de rojo de metilo se determino la habilidad de las bacterias para producir y mantener sustancias ácidas, en este caso se observo que K. pneumoniae no tiene la capacidad de producir sustancias ácidas, debido a que en la prueba no se coloreo de color rojo al aplicar el reactivo por lo tanto la prueba resulto negativa. Sin embargo, K. pneumoniae demostró poseer la capacidad de producir un producto final neutro a partir de la fermentación de la glucosa al resultar positiva para la prueba de Voges Proskauer, y generar un color rosado en la superficie del tubo al aplicarle los reactivos.

Por último las pruebas de citrato y malonato dieron positivo a las bacterias Bacillus subtilis y Salmonella typhi, respectivamente, indicando que Bacillus subtilis utiliza el citrato como única fuente de carbono, y Salmonella typhi utiliza el malonato de sodio, ambas pruebas se colorearon de un color azul, solo

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