Verificacion De Espectrofotometros

Introducción

Cuando un equipo fotométrico esta calibrado se puede asegurar confiabilidad y exactitud del mismo. Para que un espectrofotómetro funcione correctamente se debe verificar: la linealidad, la sensibilidad y la calibración.

Linealidad: son pruebas preliminares acerca de la exactitud del método, se realiza un análisis de estándares de pureza conocida que abraca el rango de linealidad deseada y tiene concentraciones en determinados puntos específicos, una vez analizados se grafica la concentración contra la media de los resultados y la linealidad se confirma cuando es posible trazar una línea recta a través de los datos puntuales que forma un ángulo de 45° con los ejes y no se desvié en ninguno de los extremos antes de alcanzar el rango de linealidad esperado.

Sensibilidad: es la probabilidad de una prueba positiva cuando está presente la enfermedad que la prueba que se le realiza la pueda detectar.

Calibración: es el uso de estándares de concentración conocida que sirven para evaluar el método de análisis. Se realiza una curva tipo de todos los metabolitos que se van analizar y los parámetros que indican que la curva tipo que se realiza está correcta son: coeficiente de relación, desviación estándar y la regla de la recta.

Resultados

Verificación de calibración y sensibilidad

LONGITUD DE ONDA ABSORBENCIA

450 0.358

460 0.415

470 0.459

480 0.496

490 0.556

500 0.593

510 0.569

520 0.501

530 0.403

540 0.285

550 0.184

Tabla y grafica 1. Verificación de la calibración y sensibilidad del espectrofotómetro, utilizando una solución de cloruro de cobalto (2.2% en HCl 1%).

Verificación de la linealidad

[mg/dL] ABSORBENCIA (500nm) % de error

26.5 0.083 -83.4

53 0.169 -66.2

106 0.368 -26.4

159 0.54 8

212 0.731 46.2

265 0.895 79

318 1.123 124.6

371 1.285 157

424 1.453 190.6

477 1.613 222.6

530 1.804 260.8

Tabla 2. Lecturas de la absorbencia de las diferentes concetraciones de cloruro de cobalto, y su porciento de error.

Grafica 2.0. Linealidad del espectrofotómetro “Spectronic genesys 20”.

Grafica 2.1. Representación del porciento de error de la linealidad de espectrofotómetro “Spectronic genesys 20”.

Conclusiones

El espectrofotómetro mostro una absorbencia de 0.569 a 510nm con una solución de cloruro de cobalto, según la literatura la absorbencia máxima que debe tener el cloruro de cobalto es de 0.5 a 510nm. Podemos decir que nuestro espectrofotómetro tiene una sensibilidad adecuada dado que la absorbencia máxima obtenida en la práctica fue muy parecida a la absorbencia máxima

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