Virus

VIRUS

A. R/: La muestra a observar debe ser fina para que pueda ser atravesada por la luz. Con este tipo de microscopio , el óptico convencional se deben utilizar métodos de tinción porque el campo claro de este no produce un nivel útil de contraste.

Las muestras vivas , y salvo que se utilicen colorantes vitales, no están teñidas con lo que el contraste que ofrecen no es suficiente para que las células puedan ser discriminadas y estudiadas mediante las ópticas convencionales de campo claro.

La microscopia de contraste de fases (microscopio invertido) y la del microscopio de interferencia nos dan la posibilidad de observar células vivas y sin ninguna preparación , ya que al realizar otros procedimientos existe la posibilidad de que algunos de sus componentes puedan perderse o distorsionarse por métodos como la fijación, coloración, congelación, y otros, así, estos instrumentos ópticos ayudan a resolver el problema.

B. Para controlar el cultivo se utilizan microscopios invertidos de contraste de fases. La luz incide desde arriba, y el contraste de fases alinea la luz desviada producida debido a que atraviesa diferentes fases por lo que podemos observar la célula. La estructura óptica de este microscopio esta colocada al revés que en un microscopio óptico convencional. Así que mientras la luz va del pie del estativo de un microscopio convencional hacia arriba pasando por el condensador, platina y objetivo hasta llegar al ocular, en el microscopio invertido la luz parte desde la bombilla situada en la parte superior de la columna trasera, atraviesa el condensador situado encima de la platina y desde allí a los oculares o a los sistemas de recogida de imagen (cámaras fotográficas, videos). Este cambio de configuración física hace posible, la utilización en el condensador de ópticas de mayor longitud focal que permiten la separación del condensador de la platina dejando espacio libre suficiente encima de la platina para posibilitar la colocación de las placas de cultivo para su visualización.

c. Inmunofluorecencia (FD) e Inmunoperoxidasa directa:

Consisten en la detección de antígenos virales en cortes histológicos de órganos sospechosos mediante la tinción con un conjugado policlonal (contra todas las proteínas del virus, no permite la diferenciación entre los pestivirus) o monoclonal (frente a la proteína E2, permite la diferenciación entre los diferentes pestivirus) marcado con isotiocianato de fluoresceína (IFD) o peroxidasa (IPD).

En cerdos vacunados con la cepa China, puede detectarse en amígdalas el virus vacunal mediante IFD hasta como máximo 2 semanas post-vacunación. Esta característica resulta útil en los programas de control, ya que en caso de aparecer un resultado positivo es posible diferenciar virus vacunal del virus campo mediante el empleo de AcM.

La ventaja de esta técnica

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