ARTICULO DE REVISIÓN TÉCNICAS MICOBIÓLOGICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

Octubre 2015

ARTICULO DE REVISIÓN

TÉCNICAS MICOBIÓLOGICAS PARA LA IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS

AUTORAS

YOLEIDA CAMILA UNCACIA

IRIS MARGARITA GALINDO LÓPEZ

FLOR MARINA RINCÓN

Universidad nacional abierta y a distancia UNAD

Palabras Claves:

Microorganismos, identificación, alimentos, bacterias, técnicas.

INTRODUCCIÓN

Las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA) son un problema de salud pública en todo el mundo y una causa importante de morbilidad, Más de 250 enfermedades conocidas se transmiten a través de alimentos. Además, este problema se acrecienta con el surgimiento de nuevas formas de transmisión, la aparición de grupos poblacionales vulnerables, y el aumento de la resistencia a los compuestos antimicrobianos en los microorganismos patógenos.

Así las autoras Milagros de Vizcarrondo y Sofía Gutiérrez de Gamboa  publicado en Enero 2002 y revisado en el año Revisión 2008,  definen la identificación microbiana como el conjunto de técnicas y procedimientos que se aplican para establecer la identidad de un microorganismo.  Y  estas  técnicas se utilizan en diferentes áreas como  son; en el área clínica donde es de vital importancia conocer cuál es el agente causal de la infección que presenta un paciente, de manera de poder tratarlo con agentes terapéuticos.

En la industria farmacéutica, cosmética y de alimentos donde las normas de control de  calidad exigen la ausencia de ciertos microorganismos.  En investigación básica donde se aísla un determinado microorganismo que debe identificarse para comprobar si se trata de un microorganismo conocido o de uno nuevo para poder clasificarlo.

A través de diversas investigaciones se ha concluido  que más del 90% de los microorganismos en ambientes naturales, no pueden ser cultivados usando las técnicas tradicionales; esto se debe a que no es posible obtener cultivos puros de ciertos microorganismos ya que  dependen de las actividades de otros microorganismos, o porque no se conocen las condiciones para su cultivo, a partir de esta realidad  se debe implementar el manejo de nuevas técnicas de identificación, análisis y priorización  de las  diversas comunidades microbianas en los alimentos fermentados.

RESUMEN

El crecimiento de la población a nivel mundial ha incrementado los niveles de contaminación. Las enfermedades transmitidas por alimentos, ocasionadas por microorganismos patógenos, constituyen un grave problema de salud pública a nivel mundial. El diagnóstico de estos microorganismos, requiere laboratorios especializados y representa varios días de análisis y costos elevados. Como alternativa a estos inconvenientes, se ha propuesto el uso de indicadores microbianos que se puedan identificar mediante el uso de métodos sencillos, rápidos y económicos.

En base a esto, la presente revisión describe las técnicas microbiológicas para la identificación de microorganismos  en  los principales métodos moleculares utilizados para  la detección e identificación de microorganismos patógenos transmitidos por alimentos. Para ello,  la información consultada se realizó de Artículos relacionados con dicha información. La literatura reciente reporta un número significativo de técnicas moleculares, alternativas, sensibles y selectivas para la detección, enumeración e identificación de microorganismos patógenos en alimentos, siendo la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) la plataforma más popular, mientras que la secuenciación de alto rendimiento se perfila como una técnica de gran aplicabilidad a futuro.

METODO

El desarrollo de este artículo de revisión  se realizó por la investigación de cada uno de los estudiantes del curso de Microbiología de la Universidad Nacional UNAD, donde se desarrollaron unas reseñas, teniendo en cuenta artículos de investigación  relacionados con las técnicas microbiológicas para le identificación de microorganismos. Con el aporte de las reseñas de cada uno y profundizando en el tema se consolido y dando como resultado un artículo de revisión sobre estas técnicas microbiológicas.

DESARROLLO DEL TEMA

Métodos de identificación de microorganismos y técnicas microbiológicas

Por cada uno de los estudiantes:

La fermentación de los alimentos por bacterias ácido lácticas es una de las formas más antiguas de conservación usadas por el hombre.

El análisis físico-químico a la leche y al queso en Paipa identificándolo como un queso semigraso y semiblando elaborado en los municipios de pacho (Cundinamarca) y belén (Boyacá) en donde se analizaron 16 muestras de las cuales 12 fueron de queso Paipa y 4 de leche cruda:

Se utilizaron los medios de cultivo MRS, M17, ATP y EMB, cada uno de estos medios son selectivos para: Lactobacillus spp, Streptococus spp., Leuconostoc spp. Y Enterobacterias respectivamente. Después, se realizó un repique en los mismos medios y se incubaron a una temperatura de 32ºC a excepción del medio EMB, que se incubó a una temperatura de 37ºC. Posteriormente, se identificaron las BAL por medio de la reacción de catalasa, oxidasa y tinción de Gram, en donde presentaron una morfología de bacilos y cocos Gram positivos y catalasa y oxidasa negativos; las BAL positivas a catalasa y oxidasa (Enterobacterias) se tuvieron en cuenta para la identificación. Finalmente, las BAL aisladas se conservaron en glicerol al 30% en congelación a -36ºC y después en nitrógeno líquido (-196ºC) para luego ser identificadas molecularmente.

La enumeración de patógenos transmitidos por alimentos es un aspecto principal del diagnóstico molecular microbiológico, especialmente si quiere utilizarse para la evaluación cuantitativa del riesgo.

El crecimiento y desarrollo de comunidades de microorganismos en los alimentos  debe orientarse a través de un enfoque ecológico para lograr que la producción de alimentos fermentados en condiciones controladas y su calidad dependan del conocimiento y control de la microbiota presente. Por eso se hace necesario implementar métodos para determinar microorganismos y tipificarlos mediante técnicas basadas en el DNA, como el RFLP, la ribotipificación, el AFLP, el ARDRA En la actualidad se utilizan diferentes técnicas  para lograr identificar estas comunidades de microorganismos como son la construcción de bibliotecas de clonas de RDNA 16S, la obtención de “huellas digitales” mediante DGGE o TGGE son ejemplos de estas técnicas. Y el RAPD.

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