Bioca

Obtención de la muestra

- Se tiene un hígado de pollo en Cloruro de Sodio al 0.9 % (suero fisiológico)

- Se procede a realizar un corte de un trozo de hígado de pollo con bisturi

Fijación

- Se realiza una fijación por inmersión con Paraformaldehído al 10% de concentración en un volumen 20 veces mayor al volumen de la muestra, durante 10 minutos.

- PFA : es la forma polimerizada del formaldehído. Es una fijador muy usado por la buena preservación del tejido, produce poca retracción tisular y es compatible con las mayoría de las tinciones histológicas.

Deshidratación

- H2O

- Etanol a concentraciones crecientes ( 70% - 90%- 96% -100%)

- Xileno o Xilol : derivado dimetilado del benceno; se utiliza para aclaramiento de los tejidos biológicos.

-Durante 5 minutos cada uno

Inclusión

-Parafina fundida (funde a 60°)

-Se coloca la muestra con parafina fundida en una cubetera

- Se dejó reposar la muestra una semana aprox.

-Luego de este tiempo se observa la parafina solidificada (solidificación a temperatura ambiente de 30 min a 6 hrs. dependiendo del tamaño de la muestra)

Corte

- Se retira la parafina solidificada por completo de la muestra

-Se procede a cortar un pequeño y delgado trozo con bisturi cerca de los um.

- El corte es colocado en un portaobjeto

Hidratación

-Xileno o Xilol

-Etanol en concentraciones decrecientes (100% - 96% - 90% - 70% )

-H2O

- Durante 5 minutos cada uno

Tinción

-El colorante usado para teñir la muestra fue "Eosina con Azul de Metileno"

-Eosina : es un colorante ácido colorea componentes y organelos citoplasmáticos, colágeno y fibras musculares; los tiñe con tonos rojos.

-Azul de metileno: colorante básico, identifica las paredes celulares y algunos organelos; especificamente los núcleos.

- Se tiene la tinción durante

Deshidratación

-H2O

-Etanol a concentraciones crecientes (70%- 96% - 90% -100% )

-Xileno o Xilol

Montaje

-Es un medio de montaje anhidro para el montaje y almacenamiento permanentes de preparaciones. Como contiene tolueno, puede ser utilizado con preparaciones que hayan sido procesadas con xileno antes del montaje.

- La muestra en el portaobjeto y con el medio de montaje se coloca un cubre objeto

Observación con microscopio óptico

- Es colocado en la platina y se le hace un barrido a toda la muestra para ir observando donde se encuentra la parte mas delgada y que se observa con mayor claridad; para concentrarnos en ella y observar las estructuras de acuerdo a la tincion utilizada

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