DETERMINACION DE GLUCOSA EN SANGRE

DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SANGRE[Método Enzimático]1.INTRODUCCIÓN

Hormonas que intervienen en la regulación de [Glucosa]

GLUCAGÓN

Es producida por las células alfa de los islotes de Langerhans en el páncreas endocrino. Es una hormonahiperglicemial ya que se incrementa en la sangre al disminuir el nivel de glucosa, cuando llega al hígadopor la vena porta causa la

glucogenólisis

(degradación de glucógeno para obtener glucosa).Cuando la necesidad de glucosa es muy grande en nuestro organismo y no se dispone de la suficientecantidad en la dieta, se puede formar glucosa mediante la

gluconeogénesis

(obtención de glucosa apartir de vías alternativas como: lactato, aminoácidos glicerol, ácidos grasos, cuerpos cetónicos, etc.).Este proceso tiene lugar en las células hepáticas, células renales, células adiposas y en el tejidomuscular. También es importante diferenciar el concepto de

glucogénesis

, que es la formación de glucosa, engeneral.

INSULINA

Hormona secretada por las células beta del páncreas endocrino (islotes de Langerhans). Se le considerahipoglicemiante, ya que cuando los niveles de glucosa en sangre se incrementan también se incrementala insulina,esto se conoce como repuesta directa a la hiperglicemia.Su concentración en sangre es similar a la de la glucosa sanguínea.

2.FUNDAMENTO

Se basa en que la glucosa es oxidada enzimáticamente por la glucosa oxidasa a ácido glucónico y aguaoxigenada.

C

6

H

12

O

6

+ O

2

+ H

2

O

Ácido Glucónico + H

2

O

2

Esta, en presencia de una peroxidasa produce la copulación oxidativa del fenol con la 4-amino fenazona,dando lugar a la formación de un cromógeno rojo cereza que es proporcional a la cantidad de glucosapresente.

H

2

O

2

+ Ácido Parahidroxibenzoico Cromógeno rojo – cereza + H

2

O

A este proceso se le denomina sistemas de relación acopladas.

3.PROCEDIMIENTO

Preparar la siguiente batería, corriendo solo una vez el Tubo Blanco y el Tubo Estándar. Tubo M.P.Tubo EstándarTubo BlancoSuero Diluido (ml.)0.01------Estándar de Glucosa(ml.)---0.01---Reactivo de Trabajo(ml.)111Incubar en baño maría a 37ºC durante 10 minutos. Retirar del baño maría y luego agregar, según latabla: Tubo M.P.Tubo EstándarTubo BlancoAgua Destilada (ml.)222Mezclar bien la solución. Leer las ABS

s

para cada unos de los tubos en el espectrofotómetro a 505 nm.Encontrar la [Glucosa] en mg/dL de las muestras de suero.

4.RESULTADOS

[Estándar de Glucosa] = 4 mg/dL[Glucosa]

STD

= 100 mg/dLABS

MP

= 1.392ABS

ESTANDAR

= 0.861

5.CÁLCULOS

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