Protocolos AFA

1. TITULO

Validación del método de análisis para la cuantificación de ácidos clorogénicos en café verde.

1. AUTOR/FECHA/ INSTITUCIÓN

Daniel Fernando Alzate Yepes - Junio de 2015 / Laboratorio de Análisis Fisicoquímico - Facultad de Ciencias Farmacéuticas y Alimentarias– Universidad de Antioquia.

1. INTRODUCCIÓN

El método de análisis para la cuantificación de ácidos clorogénicos en café verde se realiza utilizando la misma metodología de extracción de la cafeína: Agua a 78°C por 60 minutos; dilución de 10 veces; y obtención del espectro de la segunda derivada, para cuantificar el contenido de ácido clorogénico y de cafeína en el café verde.

1. OBJETIVO GENERAL Y ESPECIFICOS

GENERAL

• Realizar la validación del método de análisis para la cuantificación de ácidos clorogénicos en café verde.

ESPECIFICOS

• Constatar que se conoce el método de la cuantificación de ácidos clorogénicos y por tanto se está realizando correctamente.

• Adaptar el método  de cuantificación de ácidos clorogénicos teniendo en cuenta los materiales que se encuentran en el laboratorio, sin que los instrumentos influyan en el resultado.

• Realizar análisis  con muestras patrón para la cuantificación de ácidos clorogénicos, con el propósito de comparar y mejorar la calidad en los resultados.

1. PROBLEMA (PROPÓSITO)

El laboratorio de Análisis fisicoquímico y Bromatológico de la Facultad de ciencias farmacéuticas y alimentarias  de la Universidad de Antioquia no cuenta con el método validado de análisis para la cuantificación de ácidos clorogénicos, por tal motivo se requiere la creación e implementación de dicho método, con el propósito de conocer las diferencias en la composición química del café realizando la determinación del ácido clorogénico total, y los ácidos clorogénicos individuales.

1. JUSTIFICACIÓN.

El café es un producto que vive en demanda

1. MARCO TEORICO.

El contenido de ácidos clorogénicos  en granos de café verde es un método el cual permite la determinación de los ácidos clorogénicos totales (CGAT) por espectrofotometría, y los ácidos clorogénicos individuales y sus esteres, mediante cromatografía (HPLC).

Los ácidos clorogénicos se encuentran en las paredes celulares, se biosintetizan a partir de la fenilalanina, son precursores de la lignina, influyen en la textura y la plasticidad de las plantas, cumplen funciones similares al ácido indolacético, de protección de las plantas contra microorganismos, la luz ultravioleta.

El nombre de ácidos clorogénicos proviene del pigmento verde formado por la reacción entre el ácido cafeico con el cloruro férrico y también por la coloración de los precipitados de ácidos clorogénicos del café, formados en varias reacciones de oxidación.

1. GLOSARIO (Si se considera necesario)

ACIDOS:Es considerado tradicionalmente como cualquier compuesto químico que, cuando se disuelve en agua, produce una solución con una actividad de catión hidronio mayor que el agua pura, esto es, un pH menor que 7

INDOL ACÉTICO: Promueve y provoca el desarrollo de raíces laterales y adventicias, Estimula el desarrollo de los frutos.

LIGNINA: Es un polímero presente en las paredes celulares de organismos del reino Plantae  la lignina se encarga de engrosar el tallo.

FENILALANINA: Es un aminoácido se encuentra en las proteínas siendo uno de los 10 aminoácidos esenciales para el ser humano.

ESPECTROFOTOMETRIA: Es la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe o transmite un sistema químico en función de la longitud de onda

CROMATOGAFIA: Es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia, su principal función es separar los diferentes componentes de una muestra.

PAREDE CELUARE: La pared celular protege el contenido de la célula, y da rigidez a ésta, funciona como mediadora en todas las relaciones de la célula con el entorno y actúa como compartimiento celular. 

BIOSINTESIS: Es el proceso anabólico mediante el cual se forman las proteínas

PLASTICIDAD: Propiedad de aquello que puede cambiar de forma y conservarla de modo permanente.

PIGMENTO: Es un material que cambia el color de la luz que refleja como resultado de la absorción selectiva del color.

PRECIPITAR: Hacer que un acontecimiento o un proceso suceda o se desarrolle de una manera más rápida, acelerada o apresurada

OXIDACIONES: A toda reacción química en la que uno o más electrones se transfieren entre los reactivos, provocando un cambio en sus estados de oxidación

EXTRACCION: Es un procedimiento de separación de una sustancia que puede disolverse en dos disolventes no miscibles entre sí, con distinto grado de solubilidad y que están en contacto a través de una interface.

DILUCION: La dilución es la reducción de la concentración de una sustancia química en una disolución.

ESPECTRO: Es la imagen o registro gráfico que presenta un sistema físico al ser excitado y posteriormente analizado.

MUESTRA PATRON: Sustancia de referencia que establece la verdad analítica acerca del valor verdadero esperado.

1. HIPÓTESIS ( Si se considera necesario)

Planteamiento de la hipótesis que se pretende probar.

1. MATERIALES Y MÉTODOS

EQUIPOS Y MATERIALES

• Cromatógrafo liquido
• Equipo desgastificador
• Estufa de convención forzada
• Espectrofotómetro UV
• Rota vapor
• Molino para café
• Tamizadores
• Enfriador
• Equipo ultrasonido
• Balanzas
• Nevera
• Filtros
• Espátula

REACTIVOS

• Éter de petróleo
• Acetato de plomo
• Solución amoniacal 4ML
• Sulfito de sodio  98%
• Acetato de zinc cristalizado
• acido acético
• Hexacianoferrato de potasio II
•  Nitrógeno liquido
• Acido sulfúrico 96.9%
• Metanol grado HPLC}

• Acetonitrilo  de grado HPLC , agua grasada HOLC y ácido fosfórico 85%V / V, alta pureza

1. RESULTADOS ESPERADOS

Uso de tablas en blanco para facilitar la recolección de los datos, el tratamiento estadístico y los criterios de aceptación.

1. CRONOGRAMA/ RECURSOS