TINCION DE WRIGHT

Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los diferentes componentes celulares.

Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor facilidad.

Mediante este tipo de colorantes pueden distinguirse los aspectos morfológicos de las células:

Forma, dimensiones y contorno de las células sanguíneas.

Núcleo celular y restos de cromatina: color púrpura.

Citoplasma de linfocitos: color azul.

Citoplasma de monocitos: color grisáceo.

Granulaciones polinucleares:

•Eosinófilos: color naranja.

•Basófilos: color azul oscuro.

•Neutrófilos: color pardo.

Hematíes: color rosa pálido.

Reticulocitos: color azulado.

PROCESO

Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla de tinción con la sangre hacia arriba.

Cubrir completamente el portaobjetos con el colorante de Wright gota a gota. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar.

Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, para evitar la coloración débil. Dejar actuar de 10-15 minutos.

Lavar con agua en chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista.

Limpiar el dorso del portaobjetos con algodón humedecido en alcohol para eliminar cualquier resto de colorante.

Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.

RESULTADOS:

Los eritrocitos se observarán de color naranja o rosado.

El citoplasma de los monocitos presentarán una tonalidad azul grisácea con gránulo rojizos bastante finos y sus vacuolas características. El citoplasma de los linfocitos presentará varias tonalidades azules.

Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos aparecerán de color púrpura oscuro. Los núcleos de los monocitos de color púrpura algo más claros (lila).

Las plaquetas toman coloración violeta o púrpura.

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