Preparacion

PRESENTACIÓN

El curso práctico de Microbiología prepara al estudiante en el manejo de las técnicas básicas con el fin de estudiar tanto la morfología de los microorganismos como sus condiciones de crecimiento, metabolismo y reproducción. A través de las sesiones prácticas el estudiante podrá desarrollar las destrezas necesarias para el uso y manejo de instrumentos y equipos que le permitan formular y realizar proyectos de investigación relacionados con temas propios de la asignatura.

RECOMENDACIONES PARA EL DESARROLLO DE PRÁCTICAS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Llegue al laboratorio asignado a la hora que corresponde la práctica

Lea la guía de laboratorio con tiempo suficiente para estar informado de lo que se va a realizar y optimizar el tiempo

Colóquese la bata de trabajo antes de comenzar a desarrollar la práctica y deje las maletas u otros objetos en un lugar del laboratorio que no sean los mesones

No ingrese ni tampoco ingiera alimentos dentro del laboratorio

El uso de teléfonos celulares está prohibido en las prácticas de laboratorio. Manténgalo apagado durante el tiempo que dure la práctica

No lleve a la boca esferos, lápices u otros elementos que haya usado durante la práctica, especialmente cuando ellos han hecho contacto con los guantes o los medios de cultivo

Evite el uso de joyas durante el desarrollo de la práctica, ellas pueden ser vehículos de contaminación

Evite el uso de maquillaje y especialmente de pestañina, ya que deterioran los oculares del microscopio

Mantenga sus uñas cortas y sin esmalte

Mantenga su cabello recogido y colóquese correctamente el gorro

Verifique que el material que le ha entregado el auxiliar de laboratorio se encuentra en buen estado; de lo contrario, informe oportunamente

Cuando un medio de cultivo limpio o contaminado con microorganismos se rompa, informe de inmediato al auxiliar o al profesor para proceder a descartar el material y luego a desinfectar

El material de vidrio como las pipetas debe depositarse en recipientes que contenga solución desinfectante (hipoclorito de sodio)

Los medios de cultivo que contengan muestras deben rotularse con lápiz de cera o con cinta de enmascarar y marcador para vidrio con los siguientes datos: tipo de muestra y grupo responsable

Con el fin de optimizar el espacio en la incubadora y en la nevera, las cajas de Petri se empacan con cinta de enmascarar en forma de cruz organizadas en grupos de a 4, como máximo, y se rotula el paquete con el nombre del programa académico, día, mes y año de realización de la práctica, hora y laboratorio de la misma

Los equipos de laboratorio como los microscopios deben dejarse en el estado en que se recibieron, tapados y con los objetivos limpios (cuando se emplea aceite de inmersión con el objetivo de 100X)

Los guantes y tapabocas utilizados durante la práctica deben depositarse en la caneca o en el sitio asignado para ellos

Después de quitarse los guantes y tapabocas, lávese las manos con jabón líquido y séquelas con toallas de papel

Verifique que los mesones han quedado limpios y que el material para descartar se encuentra en el sitio indicado

La bata de laboratorio debe mantenerse dentro de una bolsa plástica después de que la práctica ha concluido. Es recomendable lavarla y desinfectarla separada de otras prendas, al menos una vez por semana

Práctica No. 1

IMPORTANCIA DE LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

(Preparó: M.Sc. Sonia Echeverry Hernández)

Introducción

La Bioseguridad en el laboratorio se define como el conjunto de acciones o medidas de seguridad requeridas para minimizar los riesgos derivados del manejo de material biológico, particularmente el proveniente de microorganismos. El objetivo de la Bioseguridad es garantizar la seguridad de la humanidad y del medio ambiente (Silva. ICA, 2001, citado en la Cartilla de Bioseguridad y Bioética en Biotecnología. Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional).

Dichas acciones o medidas están contenidas en documentos, unos de carácter internacional y otros del orden nacional.

Objetivos

Comprobar la importancia de las medidas de asepsia en las prácticas de Microbiología

Materiales y métodos

Medios de cultivo (agar nutritivo), incubadora, hipoclorito de sodio, detergente, jabón antibacterial, sensidiscos de papel filtro estériles, pinzas estériles, tapabocas

Con ayuda de un escobillón estéril (hisopo) tome muestras de diferentes ambientes: mesón del laboratorio, pasamanos, sanitario, lavamanos, manija de cierre en una puerta, entre otras. Diluya la muestra colocando el hisopo en un tubo que contiene agua destilada estéril; transporte el tubo al laboratorio para la posterior siembra

Manteniendo el mechero prendido, retire la tapa de una de las cajas de Petri que contiene agar nutritivo y deslice con cuidado el escobillón que contiene la muestra. Divida la caja en dos secciones y en una de ellas coloque un sensidisco de papel impregnado con hipoclorito de sodio

Repita el procedimiento anterior (numerales 1 y 2) reemplazando el hipoclorito de sodio por detergente (extrán u otro similar)

Pase los dedos de la mano, sin lavar, sobre la superficie del agar nutritivo contenido en otra caja. Divida la caja en dos secciones y en una de ellas coloque un sensidisco de papel impregnado con jabón antibacterial

Tome otra caja con agar nutritivo y destápela cerca de la llama del mechero. Hable por unos minutos con sus compañeros de grupo y luego tapéla de nuevo

Colóquese un tapaboca y repita el procedimiento anterior (numeral 5), cerciorándose que sus compañeros han usado también el tapaboca

Rotule las cajas de acuerdo con las indicaciones del docente y llévelas en posición invertida a la incubadora durante 48 horas a una temperatura de 37ºC

8- Cumplido este tiempo retire el material de la incubadora y manténgalo en nevera a temperatura de refrigeración (4ºC) hasta el momento de su lectura (interpretación de los resultados en la siguiente práctica)

Nota: Si no se dispone de incubadora los medios de cultivo pueden mantenerse a temperatura ambiente durante 5 a 8 días o hasta cuando se evidencie crecimiento

Resultados y discusión de resultados

Observe el crecimiento de los microorganismos en cada una de las cajas, teniendo en cuenta el número y las características relevantes de ellos. Confronte sus resultados con lo reportado en la literatura, teniendo en cuenta los siguientes aspectos:

a)

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